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靶向Trop-2 CAR-T细胞的制备及其体外对卵巢癌细胞杀伤作用的研究
引用本文:徐亚如,周 荧,唐 奇,刘振云,黄骁辰,杨婷婷,张慧林,赵 薇,蒯兴旺,仇镇宁,朱 进,冯振卿. 靶向Trop-2 CAR-T细胞的制备及其体外对卵巢癌细胞杀伤作用的研究[J]. 南京医科大学学报(自然科学版), 2017, 0(6): 653-658
作者姓名:徐亚如  周 荧  唐 奇  刘振云  黄骁辰  杨婷婷  张慧林  赵 薇  蒯兴旺  仇镇宁  朱 进  冯振卿
作者单位:南京医科大学病理学系,江苏 南京 211166;南京医科大学国家卫计委抗体技术重点实验室,江苏 南京 211166,南京医科大学第二附属医院耳鼻喉科,江苏 南京 210011,南京医科大学国家卫计委抗体技术重点实验室,江苏 南京 211166,安徽未名细胞治疗有限公司,安徽 合肥 238000,南京医科大学病理学系,江苏 南京 211166;南京医科大学国家卫计委抗体技术重点实验室,江苏 南京 211166,南京医科大学病理学系,江苏 南京 211166;南京医科大学国家卫计委抗体技术重点实验室,江苏 南京 211166,南京医科大学附属南京妇幼保健院妇产科,江苏 南京 210004,南京医科大学病理学系,江苏 南京 211166;南京医科大学国家卫计委抗体技术重点实验室,江苏 南京 211166,南京医科大学病理学系,江苏 南京 211166;南京医科大学国家卫计委抗体技术重点实验室,江苏 南京 211166,南京医科大学国家卫计委抗体技术重点实验室,江苏 南京 211166,南京医科大学国家卫计委抗体技术重点实验室,江苏 南京 211166;南京军区军事医学研究所,江苏 南京 210002,南京医科大学病理学系,江苏 南京 211166;南京医科大学国家卫计委抗体技术重点实验室,江苏 南京 211166
基金项目:国家自然科学基金(81602119);江苏省科学技术厅重点研发专项基金(BE2016799)
摘    要:目的:制备靶向人滋养层细胞表面抗原2(human trophoblast cell surface antigen 2 , Trop-2)的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell , CAR-T),观察Trop-2 CAR-T细胞在体外对卵巢癌细胞增殖的影响。方法:运用分子克隆及基因重组技术构建Trop-2 CAR;采用Western blot检测Trop-2 CAR在293T细胞中的表达;CCK-8法检测Trop-2 CAR-T细胞对卵巢癌细胞增殖的影响;ELISA检测细胞因子分泌的变化。结果:酶切鉴定及测序分析结果表明,Trop-2 CAR各基因片段连接正确;Western blot检测结果显示,该质粒能够在293T细胞中有效表达;CCK-8结果显示,制备的Trop-2 CAR-T细胞在体外能明显抑制表达Trop-2的卵巢癌细胞的增殖(P<0.05);ELISA检测结果表明Trop-2 CAR-T细胞与表达Trop-2的卵巢癌细胞共培养后,干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白介素(interleukin-2,IL-2)细胞因子分泌增加(P<0.01)。结论:该研究成功制备了Trop-2 CAR-T细胞,可有效抑制Trop-2表达阳性的卵巢癌细胞的增殖。

关 键 词:嵌合抗原受体;Trop-2;卵巢癌
收稿时间:2017-01-12

Construction of Trop-2-targeted chimeric antigen receptor-modified T cells and their effects on the proliferation of ovarian cancer cells in vitro
Xu Yaru,Zhou Ying,Tang Qi,Liu Zhengyun,Huang Xiaochen,Yang Tingting,Zhang Huilin,Zhao Wei,Kuai Xingwang,Qiu Zhenning,Zhu Jin and Feng Zhenqing. Construction of Trop-2-targeted chimeric antigen receptor-modified T cells and their effects on the proliferation of ovarian cancer cells in vitro[J]. Acta Universitatis Medicinalis Nanjing, 2017, 0(6): 653-658
Authors:Xu Yaru  Zhou Ying  Tang Qi  Liu Zhengyun  Huang Xiaochen  Yang Tingting  Zhang Huilin  Zhao Wei  Kuai Xingwang  Qiu Zhenning  Zhu Jin  Feng Zhenqing
Affiliation:Department of Pathology, NJMU, Nanjing 211166; Key Laboratory of Antibody Technology, National Health and Family Planning Commission, NJMU, Nanjing 211166,Department of Otolaryngology, the Second Affiliated Hospital of NJMU, Nanjing 210011,Key Laboratory of Antibody Technology, National Health and Family Planning Commission, NJMU, Nanjing 211166,Sinobioway Cell Therapy Limited Liability Company, Hefei 238000,Department of Pathology, NJMU, Nanjing 211166; 2Key Laboratory of Antibody Technology, National Health and Family Planning Commission, NJMU, Nanjing 211166,Department of Pathology, NJMU, Nanjing 211166; 2Key Laboratory of Antibody Technology, National Health and Family Planning Commission, NJMU, Nanjing 211166,Obstetrics and Gynecology Depantment, Naning Maternity and Child Care Hopsital Affiliated to NJMU, Nanjing 210004,Department of Pathology, NJMU, Nanjing 211166; 2Key Laboratory of Antibody Technology, National Health and Family Planning Commission, NJMU, Nanjing 211166,Department of Pathology, NJMU, Nanjing 211166; 2Key Laboratory of Antibody Technology, National Health and Family Planning Commission, NJMU, Nanjing 211166,Key Laboratory of Antibody Technology, National Health and Family Planning Commission, NJMU, Nanjing 211166,Key Laboratory of Antibody Technology, National Health and Family Planning Commission, NJMU, Nanjing 211166;Medical Research Institute of Nanjing Military Region, Nanjing 210002, China and Department of Pathology, NJMU, Nanjing 211166; 2Key Laboratory of Antibody Technology, National Health and Family Planning Commission, NJMU, Nanjing 211166
Abstract:
Keywords:chimeric antigen receptor   Trop-2   ovarian cancer
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