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siRNA反向转染人肺动脉平滑肌细胞的条件优化
作者姓名:赵垚  白振忠  苏效东  李斌  韩士瑞  冯仁杰
作者单位:赵垚 (青海大学医学院 西宁 810001); 白振忠 (青海大学医学院 西宁 810001); 苏效东 (青海大学医学院 西宁 810001); 李斌 (青海大学医学院 西宁 810001); 韩士瑞 (青海大学医学院 西宁 810001); 冯仁杰 (青海大学医学院 西宁 810001);
基金项目:青海大学医学院中青年科研项目(2011-KYY-05)青海大学中青年科研项目(项目编号:2013-QYY-12)
摘    要:目的 寻找小分子干扰RNA转染人肺动脉平滑肌细胞的的最佳条件,建立有效的转染体系.方法 采用化学合成的能够抑制管家基因表达的siRNA,以0,5,10,15,30nmol/L的siRNA浓度,应用脂质体Lipofacet-amine RNAi MAX转染人肺动脉平滑肌细胞,转染48小时后通过显微镜观察和CCK-8检测细胞的增殖情况,评估转染效率.结果 对照组细胞生长正常,在不同转染浓度下,细胞的生长情况受到不同程度的影响.试剂对照组与空白对照组(0nmol/L组)细胞增殖无差异(P>0.05),10nmol/L以上浓度组的转染效率显著高于5nmol/L组(P<0.05),10、15和30nmol/L组转染效率差异不显著(P>0.05).结论 化学合成的siRNA可以在10nmol/L的浓度即可获得理想的转染效果.

关 键 词:人肺动脉平滑肌细胞  siRNA  转染
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