达格列净对高脂饮食诱导小鼠心肌纤维化改善作用研究

目的探讨达格列净对高脂饮食诱导小鼠的心肌纤维化的改善作用。方法高脂饮食喂养10只SPF级雄性野生型C57BL小鼠36周,建立心肌纤维化损伤模型,然后将小鼠随机分为纯水对照组和达格列净组,每组各5只。给予纯水对照组纯水喂养12周;给予达格列净组达格列净喂养干预12周。应用体外培养的H9C2大鼠心肌细胞为模型,将传代细胞分别加入脂多糖建立脂多糖组,脂多糖+达格列净0.4μmol/L建立达格列净0.4μmol/L组,脂多糖+达格列净0.8μmol/L建立达格列净0.8μmol/L组,未加入脂多糖干预组作为空白对照组。定期超声检测小鼠心功能、体质量、空腹血糖。心脏做石蜡包埋,做苏木素-伊红染色、WGA荧光染色、Masson、Collagen I荧光及天狼星红染色,观察心脏形态学变化。应用CD68免疫组化检测心肌炎症情况。采用蛋白免疫印迹法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)表达水平。结果与纯水对照组比较,达格列净组小鼠干预2周体质量、血糖明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。超声评价两组小鼠心功能发现,达格列净组小鼠8周、16周左室射血分数显著高于纯水对照组,差异有统计学意义(P<0.05);达格列净组小鼠16周左室收缩分数高于纯水对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与纯水对照组比较,达格列净组Masson和天狼星红染色纤维化程度明显减轻。CollagenⅠ荧光染色显示,达格列净组心肌细胞胶原表达明显减少。WGA染色发现,达格列净组小鼠心肌细胞面积较纯水对照组显著缩小。CD68免疫组化结果显示,达格列净组小鼠心肌细胞中CD68分子表达较纯水对照组小鼠显著降低。脂多糖组与达格列净0.4μmol/L组的TNF-α、IL-1β、MCP-1表达水平明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);达格列净0.4μmol/L组与达格列净0.8μmol/L组的TNF-α、IL-1β、MCP-1表达水平明显低于脂多糖组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论达格列净干预可以直接改善心肌细胞炎症,对抗高脂喂养小鼠的心肌纤维化重构和心功能损伤。