维甲酸联合曲古抑素对甲状腺癌细胞的诱导分化作用

背景与目的:维甲酸诱导甲状腺癌分化的有效率约30%,但其毒副作用限制了临床应用。两种以上诱导剂联合应用于肿瘤的分化,临床已开展了Ⅰ～Ⅲ期试验。但对维甲酸和组蛋白脱乙酰基酶的抑制剂的联合应用,未有报道。本试验初步研究全反式维甲酸(retinoic acid,RA)联合曲古抑素(trichostain A,TSA)诱导人乳头状甲状腺癌细胞株(K1)和人滤泡状甲状腺癌细胞株(FTC-133)的分化,增强诱导作用的效果,同时降低单一药物的毒副作用,为临床前期试验提供理论依据。方法:RA联合TSA,分为4种浓度,分别为1组RA1×10-4mol/L+TSA1.65×10-7mol/L、2组RA1×10-4mol/L+TSA3.31×10-7mol/L、3组RA1×10-5mol/L+TSA1.65×10-7mol/L、4组RA1×10-5mol/L+TSA3.31×10-7mol/L,在3个时间点(12、24、48h)处理两种细胞后,采用苏木精-伊红染色后,观察细胞生长的数量、形态;采用氮蓝四唑盐法(methythiazoly ltetrazolium,MTT)计算细胞生存率(survival rate,SR),研究联合药物对细胞的增殖、抑制和毒性作用;采用电化学发光法测定两种细胞株培养液中,甲状腺球蛋白(thyroglobulin,Tg)的水平,研究联合药物对肿瘤细胞的诱导分化作用。结果:联合药物作用K1和FTC-133后,细胞形态趋于规则,细胞间隔增大,细胞核明显缩小。4种浓度、3个时间点SR的方差分析,K1的F值分别为:23.52、170.14,FTC-133的F值分别为:57.09、224.35(P=0.000,均0.01),有统计学意义。SNK分析,SR由低到高的排列分别为:2组1组4组3组。4种浓度、3个时间点Tg方差分析,K1的F值分别为:69.63、101.07,FTC-133的F值分别为:79.77、81.72(P=0.000,均0.01),差异有统计学意义。LSD两两比较:K1和FTC-133的1组与3组比较,P分别为:0.06、0.2,0.05,两者之间差异无统计学意义,其他组均有统计学意义。结论:低浓度RA联合低浓度TSA,既可以抑制K1和FTC-133增殖,降低药物毒性作用,又可以增强对肿瘤细胞的诱导分化。其可能的机制是,TSA作用于转录步骤的DNA前调节,RA可能作用于转录步骤的信号后续调节,两种作用可能形成增强作用。通过转录后的传导系统,达到了抑制肿瘤细胞增殖和增强诱导分化的作用。