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RNA干扰survivin基因增强SKBr-3细胞对多柔吡星敏感性的体外研究
引用本文:李庆霞,王娟,赵文清,刘家云,黄红艳,张明,杨安钢.RNA干扰survivin基因增强SKBr-3细胞对多柔吡星敏感性的体外研究[J].第三军医大学学报,2010,32(11).
作者姓名:李庆霞  王娟  赵文清  刘家云  黄红艳  张明  杨安钢
作者单位:1. 河北省人民医院肿瘤一科,石家庄,050051
2. 第四军医大学:附属西京医院检验科,西安,710032
3. 军事医学科学院附属307医院肿瘤三科,北京,100071
4. 第四军医大学:免疫学教研室,西安,710032
基金项目:国家自然科学基金,河北省科技支撑计划 
摘    要:目的 探讨抑制survivin基因的表达对人乳腺癌SKBr-3细胞化疗敏感性的影响.方法 构建针对survivin基因序列特异性shRNA的表达载体,脂质体转染SKBr-3,G418筛选阳性克隆.实验分为RNA干扰组(S1&P),脂质体对照组(H1&P)和空白对照组.光镜观察转染后细胞的形态变化;0.5 μg/ml 多柔吡星作用于转染后的细胞,电镜观察细胞形态学变化;TUNEL染色、Annexin V荧光标记检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖的抑制率.结果 成功构建具有新霉素抗性的靶向survivin的序列特异性shRNA表达载体,基因测序完全正确;转染后干扰组细胞均发生细胞凋亡的形态学改变;低剂量多柔吡星诱导后,TUNEL染色结果,S1&P组凋亡细胞比例(23.6±4.8)%明显高于H1&P组(4.1±1.1) %和空白对照组(3.2±1.4) %(P<0.05),表明转染了RNA干涉载体的SKBr-3细胞对低剂量多柔吡星的敏感性显著增加;Annexin-V染色结果:空白对照组凋亡比例为(17.43±3.12)%,H1&P组为(20.51±4.67)%,S1&P组为(68.76±8.49)%,后者与前两者比较均有统计学差异(P<0.05).干扰组细胞凋亡率、细胞增殖的抑制率均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 体外实验证实抑制survivin基因的表达可提高乳腺癌SKBr-3细胞对多柔吡星的敏感性.

关 键 词:RNA干扰  SKBr-3细胞  药物敏感性

RNA-interfered survivin gene increases sensitivity of SKBr-3 cells to doxorubicin: an in vitro study
Li Qingxia,Wang Juan,Zhao Wenqing,Liu Jiayun,Huang Hongyan,Zhang Ming,Yang Angang.RNA-interfered survivin gene increases sensitivity of SKBr-3 cells to doxorubicin: an in vitro study[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2010,32(11).
Authors:Li Qingxia  Wang Juan  Zhao Wenqing  Liu Jiayun  Huang Hongyan  Zhang Ming  Yang Angang
Abstract:
Keywords:survivin
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