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| 铜绿假单胞菌外膜蛋白OprF基因的克隆与原核表达 | |
| 引用本文： | 陈建国,苏兆亮,柳迎昭,戴晓莉,薛渊,王胜军,邵启祥,许化溪.铜绿假单胞菌外膜蛋白OprF基因的克隆与原核表达[J].现代预防医学,2009,36(5). |
| 作者姓名： | 陈建国 苏兆亮 柳迎昭 戴晓莉 薛渊 王胜军 邵启祥 许化溪 |
| 作者单位： | 1. 江苏大学附属人民医院,镇江,212002;江苏大学医学技术学院 2. 江苏大学医学技术学院 3. 江苏大学附属人民医院,镇江,212002 |
| 基金项目： | 江苏省社会发展科技项目，镇江市社会发展项目 |
| 摘 要： | 目的]克隆铜绿假单胞菌OprF基因,并进行原核表达,以期进一步开展铜绿假单胞菌基因工程疫苗的研究. 方法]利用PCR技术从铜绿假单胞菌基因组中扩增出OprF基因.采用T-A克隆构建pMD18-T-OprF重组质粒,测序正确后经BamH Ⅰ、Hind Ⅲ双酶切获得OprF片段,插入到表达载体pET32a,获得pET32a-OprF重组表达质粒并在表达宿主菌E.Coli BL21中诱导表达,利用Ni-NTA柱对目的蛋白进行纯化,通过SDS-PAGE电泳和蛋白质印迹进行鉴定. 结果]克隆OprF基因(459 bp)并经DNA测序证实,表达重组蛋白OprF并获得纯化蛋白,经SDS-PAGE电泳和蛋白质印迹鉴定正确.结论]成功克隆了OprF基因并获得原核表达物,为铜绿假单胞菌的致病性研究和开展基因工程疫苗的研制奠定了基础. |
| 关 键 词： | 铜绿假单胞菌 克隆与表达 疫苗 |
CLONING AND PROKARYOTIC EXPRESSION OF THE OPRF GENE FROM PSEUDOMONAS AERUGINOSA |
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| Abstract: | |
| Keywords: | OprF |
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