大肠杆菌表达耐热DNA聚合酶的纯化和鉴定 |
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引用本文: | 葛银林,邹承淑,闫梅英,邵济钧. 大肠杆菌表达耐热DNA聚合酶的纯化和鉴定[J]. 青岛大学医学院学报, 1998, 0(4) |
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作者姓名: | 葛银林 邹承淑 闫梅英 邵济钧 |
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作者单位: | 青岛医学院分子病毒学实验室 |
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摘 要: | 目的探讨工程菌表达的耐热DNA聚合酶的纯化方法。②方法收集IPTG诱导带有耐热DNA聚合酶(TD聚合酶)基因表达质粒的工程菌株DH-TD4,用溶菌酶裂解,60℃处理后,上清液用硫酸铵沉淀,根据溶解度差异进行粗分级,然后进行离子交换层析细分级,并经聚合酶链式反应(PCR扩增)鉴定其活性。③结果纯化的TD聚合酶具有良好的聚合活性。④结论溶解度差异与离子交换层析是工程菌表达的耐热DNA聚合酶纯化的主要步骤。基因工程制备的DNA聚合酶可用于PCR检测
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关 键 词: | 脱氧核糖核酸酶类;离子交换;纯化;酶稳定性;大肠杆菌 |
PURIFICATION AND IDENTIFICATION OF HEAT RESISTANCE DNA POLYMERASE EXPRESSED BY ESCHERICHIA COLI |
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Abstract: | |
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Keywords: | deoxyribonuclease ion exchange purification stability of enzyme escherichia coli |
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