微柱凝胶技术检测血型抗体IgG亚型试验方法的建立

目的:建立微柱凝胶技术用于检测血型抗体IgG亚型(IgG_1、IgG_2、IgG_3、IgG_4)的试验方法。方法:筛选6种不同规格的葡聚糖凝胶(颗粒直径在25~100μm)制备微柱凝胶卡,对添加的IgG亚型单抗的最佳稀释度、特异性、重复性和灵敏度进行对比试验,采用正交试验对试剂红细胞浓度及加样量进行筛选。结果:通过筛选抗球蛋白IgG亚类单克隆抗体的效价、亲和力以及与凝胶微粒最佳混合比例,建立凝胶微柱反应体系。选择颗粒直径为75μm(G-75)的葡聚糖凝胶作为灌注凝胶,添加A厂家的IgG亚型单抗4倍稀释后与凝胶混合能够满足检测特异性和灵敏度的要求,加样量选择25μl被检血清与50μl浓度0.8%~1.0%的悬浮红细胞反应,试验结果满意。结论:通过对试验体系的优化组合,成功研制了用于检测血型抗体IgG亚型的微柱凝胶检测技术方法。