| 整合素αvβ3特异性结合肽的筛选及初步鉴定 |
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| 引用本文： | 李雪松,吴虹晔,熊燕,李晓武,董家鸿.整合素αvβ3特异性结合肽的筛选及初步鉴定[J].第三军医大学学报,2009,31(22):2272-2274. |
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| 作者姓名： | 李雪松 吴虹晔 熊燕 李晓武 董家鸿 |
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| 作者单位： | 1. 第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所,重庆,400038
2. 解放军总医院肝胆外科,北京,100037 |
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| 摘 要： | 目的 应用噬菌体随机肽库展示技术筛选能与整合素αvβ3分子具特异性结合功能的小肽分子,并对其功能进行初步鉴定.方法 根据整合素αvβ3分子细胞外配体结合区域的品体结构及蛋白质序列设计①～⑤号5条短肽,并作为筛选配基,分别经过3轮"吸附-洗脱-扩增"后,ELISA鉴定阳性克隆,DNA测序和分析,粘附试验进一步分析化学合成多肽的功能.结果 经3轮亲和筛选后,噬菌体克隆得到有效富集,以⑤号肽为代表,ELISA鉴定显示7个阳性克隆能与⑤号合成短肽有较强结合活性.进行DNA测序,多重序列分析获得2个多肽基序:****HRH,HWR****.粘附试验表明化学合成多肽FITC-HLPWHRH,FITC-HWRLHPH与表达整合素αvβ3的细胞株具有一定的亲和性,且结合能被αvβ3分子配体纤维连接蛋白所抑制.结论 通过噬菌体随机展示肽库技术在体外对合成的短肽进行筛选,可以获得与整合素αvβ3分子具特异性结合能力的小肽分子.
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| 关 键 词： | 整合素αvβ3 噬菌体肽库 结合肽 淘选 integrin αvβ3 |
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