miR-23a调控ESRP1干预直肠癌细胞增殖和凋亡

目的 分析微小RNA-23a （microRNAs-23a，miR-23a）在直肠癌组织及细胞系中的相对表达水平，以及miR-23a对直肠癌细胞增殖和凋亡的作用，并分析其可能作用机制。方法 采用qRT-PCR检测miR-23a在36例直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达水平；利用qRT-PCR检测miR-23a在直肠癌SW480细胞及人正常结肠上皮细胞株NCM460中的表达；合成miR-23a抑制剂（inhibitor） RNA片段和抑制剂阴性对照RNA片段（inhibitor negative control，inhibitor NC），并将其分别转染至SW480细胞后，通过CCK-8法检测miR-23a inhibitor转染SW480细胞后对细胞增殖的影响；流式细胞术检测转染后细胞凋亡率；Western blot法检测上皮剪接调节蛋白1（epithelial splicing regulatory protein 1，ESRPl）蛋白在SW480细胞中的表达水平；构建野生型pGL3-ESRP1-3''UTR （wt-pGL3-ESRP1-3''UTR）或突变型pGL3-ESRP1-3''UTR （mut-pGL3-ESRP1-3''UTR）质粒，HEK293和SW480细胞经上述质粒分别与miR-23a inhibitor或inhibitor NC共转染后测定双荧光素酶活性。结果 与癌旁正常组织相比较，miR-23a在直肠癌组织中的相对表达水平明显上调，差异有统计学意义（P=0.000）；与NCM460细胞相比较，miR-23a在SW480细胞中的表达量显著上调，差异有统计学意义（P=0.000）；SW480细胞转染miR-23a inhibitor后，细胞增殖较inhibitor NC组下降35.54%±5.27%，两组结果差异有统计学意义（P=0.000）；转染miR-23a inhibitor后SW480细胞早期凋亡率明显高于inhibitor NC组（P=0.000）；荧光素酶报告基因结果表明ESRP1是miR-23a的直接靶基因；SW480细胞转染inhibitor NC后对ESRP1蛋白表达无明显影响，而转染miR-23a inhibitor至SW480细胞后ESRP1蛋白表达水平明显升高。结论 miR-23a在直肠癌组织和细胞系中的表达均显著升高，miR-23a可通过下游靶基因ESRP1从而调控直肠癌细胞增殖和凋亡。

miR-23a Regulates Proliferation and Apoptosis of Rectal Cancer via Targeting Gene ESRP1