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三七病程相关蛋白PR10-2基因的克隆、表达及功能初步分析
引用本文:杨丹,包燚,陈丽梅,崔秀明,李昆志. 三七病程相关蛋白PR10-2基因的克隆、表达及功能初步分析[J]. 中国中药杂志, 2017, 42(16): 3106-3111
作者姓名:杨丹  包燚  陈丽梅  崔秀明  李昆志
作者单位:昆明理工大学 生命科学与技术学院, 云南 昆明 650500,昆明理工大学 生命科学与技术学院, 云南 昆明 650500,昆明理工大学 生命科学与技术学院, 云南 昆明 650500,昆明理工大学 生命科学与技术学院, 云南 昆明 650500;云南省三七资源可持续利用重点实验室, 云南 昆明 650500,昆明理工大学 生命科学与技术学院, 云南 昆明 650500
基金项目:国家自然科学基金项目(81503348);哈尔滨市青年科技创新人才基金项目(2012RFOYSO42)
摘    要:在转录组测序的基础上,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从三七主根中分离到三七病程相关蛋白10(pathogensis related protein 10,PR10)基因,命名为PnPR10-2,测序结果表明该序列长465 bp,编码154个氨基酸。氨基酸序列同源性及系统发育树分析发现,PnPR10-2与人参的PR10-2蛋白同源性最高,具有典型的病程相关蛋白Bet v I保守结构域。构建了重组载体pET32a(+)-PnPR10-2,在宿主菌Escherichia coli BL21中诱导表达融合蛋白,优化诱导条件,PnPR10-2融合蛋白在E.coli BL21中以可溶性和包涵体蛋白2种形式大量表达。纯化上清中的重组蛋白,运用纸片法分析纯化重组蛋白的体外抑菌活性,其对三七根腐病病菌腐皮镰刀菌Fusarium solani和坏损柱孢菌Cylindrocarpon destructans具有一定的抑制作用,猜测该基因可能参与了三七抗根腐病的防御反应。

关 键 词:三七  根腐病  病程相关蛋白  原核表达
收稿时间:2017-05-25

Molecular cloning, bacterial expression analysis and functional characterization of pathogenesis-related PR10-2 gene in Panax notoginseng
YANG Dan,BAO Yi,CHEN Li-mei,CUI Xiu-ming and LI Kun-zhi. Molecular cloning, bacterial expression analysis and functional characterization of pathogenesis-related PR10-2 gene in Panax notoginseng[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2017, 42(16): 3106-3111
Authors:YANG Dan  BAO Yi  CHEN Li-mei  CUI Xiu-ming  LI Kun-zhi
Affiliation:Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China,Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China,Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China,Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China;Key Laboratory of sustainable utilization of Panax notoginseng Resources of Yunnan Province, Kunming 650500, China and Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China
Abstract:
Keywords:Panax notoginseng  root rot disease  pathogenesis-related protein  prokaryotic expression
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