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NOSTRIN基因高表达诱导脐静脉内皮细胞生物活性改变的研究
引用本文:相文佩,陈汉平,张铭,沈红玲,徐晓燕. NOSTRIN基因高表达诱导脐静脉内皮细胞生物活性改变的研究[J]. 中华围产医学杂志, 2007, 10(1): 14-18,73
作者姓名:相文佩  陈汉平  张铭  沈红玲  徐晓燕
作者单位:1. 430030,武汉,华中科技大学同济医学院计划生育研究所
2. 430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科
摘    要:目的研究人内皮型一氧化氮合酶运输介导物(endothelialnitricoxidesynthasetrafficinducer,NOSTRIN)基因在体外培养的人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVEC)中的过度表达对该细胞生物学特性的影响。方法脂质体介导转染体外培养的HU-VEC,G418筛选阳性克隆。免疫组织化学法检测第八因子相关抗原(FⅧRAg)的表达;细胞计数法绘制细胞生长曲线以观察细胞的增殖能力;Western印迹检测细胞中NOSTRIN和eNOS蛋白质的表达;分光光度法和硝酸还原酶法分别测定细胞培养上清中eNOS的活性和NO代谢产物亚硝酸基/亚硝基(NO2-/NO3-)水平;光镜、电镜观察细胞的形态和超微结构。结果转染前后细胞均为血管内皮来源细胞;转染NOSTRIN基因后细胞的增殖能力明显降低;Western印迹显示细胞转染NOS-TRIN基因后其表达量明显增高,而eNOS蛋白质的表达量在各组细胞之间无差异(P>0·05);转染NOSTRIN的细胞培养上清中eNOS活性[(11.727±3.09)U/ml]与转染空载体细胞[(22·69±3·36)U/ml]和对照组细胞[(21.85±3.47)U/ml]比较降低显著(P<0·01),同时转染NOSTRIN细胞培养上清中NO2-/NO3-[(25.56±2.49)μmol/L],与转染空载体细胞[(48.37±2.61)μmol/L]和对照组[(49.06±2.78)μmol/L]比较显著降低(P<0.01);光镜和电镜观察看到转染NOSTRIN后对HUVEC有损伤作用(HUVEC拉长、微绒毛变短、细胞膜损伤,胞浆内有脂滴空泡,核膜不完整)。结论NOSTRIN的高表达影响了HUVEC的生物学特性,对HUVEC有明显的损伤作用。

关 键 词:胞间信号肽类和蛋白质类  一氧化氮合酶  脐静脉  内皮  血管  转染
收稿时间:2005-11-08

Effect of overexpression of endothelial nitric oxide synthase traffic inducer on human umbilical vein endothelial cells
XIANG Wen-pei,CHEN Han-ping,ZHANG Ming,et al.. Effect of overexpression of endothelial nitric oxide synthase traffic inducer on human umbilical vein endothelial cells[J]. Chinese Journal of Perinatal Medicine, 2007, 10(1): 14-18,73
Authors:XIANG Wen-pei  CHEN Han-ping  ZHANG Ming  et al.
Affiliation:XIANG Wen-pei*,CHEN Han-ping,ZHANG Ming,et al. *Institute of Family Planning Research,Tongji Medical College,Huazhong Science and Technology University,Wuhan 430030,China
Abstract:
Keywords:Intercellular signaling peptides and proteins  Nitric   oxide synthase  Umbilical veins  Endothelium   vascular  Transfection
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