| 靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因的siRNA表达载体构建及体外抑制作用 |
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| 引用本文： | 黄秋林,于永政,阳勇,吕忠诚. 靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因的siRNA表达载体构建及体外抑制作用[J]. 世界华人消化杂志, 2009, 17(2) |
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| 作者姓名： | 黄秋林 于永政 阳勇 吕忠诚 |
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| 作者单位： | 南华大学附属第一医院普通外科 湖南省衡阳市 421001;南华大学附属第一医院普通外科 湖南省衡阳市 421001;南华大学附属第一医院普通外科 湖南省衡阳市 421001;南华大学附属第一医院普通外科 湖南省衡阳市 421001 |
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| 基金项目： | 湖南省自然科学基金，湖南省卫生厅科研项目，湖南省高等学校科学研究项目 |
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| 摘 要： | 目的: 构建靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因的siRNA表达载体并在体外检测其对VEGF基因表达的抑制作用.方法: 设计合成靶向HepG2细胞VEGF基因的siRNA cDNA序列并与pSUPER载体连接, 构建VEGF siRNA表达载体, 经酶切鉴定和测序确认后, 脂质体2000介导VEGF siRNA转染HepG2细胞. RT-PCR及Western blot检测VEGFsiRNA表达载体转染的HepG2细胞中VEGF基因表达.结果: 通过双酶切鉴定和测序分析, 成功构建了靶向HepG2细胞VEGF基因的siRNA表达载体. RT-PCR和Western blot法检测转染VEGFsiRNA表达载体的HepG2细胞VEGF mRNA及VEGF165表达下调, 其抑制率分别为65%和74%. 实验组中的HepG2中VEGF mRNA表达较阴性对照组、空载体组表达量显著下降(0.304±0.062 vs 0.896±0.061, 0.884±0.074,P<0.05).结论: 成功构建了靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因的siRNA表达载体, 且该载体在体外能有效抑制HepG2细胞VEGF基因表达.
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| 关 键 词： | RNA干扰 血管内皮细胞生长因子 肝癌 |
Construction of VEGF siRNA expression vector and its inhibition to VEGF in HepG2 cells |
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| Qiu-Lin Huang,Yong-Zheng Yu,Yong Yang,Zhong-Cheng Lv. Construction of VEGF siRNA expression vector and its inhibition to VEGF in HepG2 cells[J]. World Chinese Journal of Digestology, 2009, 17(2) |
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| Authors: | Qiu-Lin Huang Yong-Zheng Yu Yong Yang Zhong-Cheng Lv |
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