TNF-α基因转染多药耐药性人乳腺癌细胞的基因表达与生物学效应

目的　探索TNF α基因能否成功导入耐药细胞并获得表达 ,发挥生物学效应。方法　以重组逆转录病毒为载体将TNF α基因导入具有多药耐药 (MDR )表型的人乳腺癌细胞系MCF7/ADR ,经G 418抗性筛选获 4株阳性克隆。PCR、Elisa法鉴定并检测TNF α基因的整合和表达。细胞计数法观察细胞生长速度的改变 ,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果　 4株阳性克隆整合了TNF α基因并获得表达 ,分泌TNF α量分别为 341pg/ml(10 6cell/48h)、5 40 pg/ml、1737pg/ml、2 875 pg/ml。与对照细胞相比 ,TNF α分泌量较低的 2株细胞克隆生长速度无明显减慢 ,而 2株高表达TNF α的细胞生长速度明显减慢 ,生长抑制率分别为 32 .4%、5 4.8% ,且细胞周期受阻于S G2 /M期。结论　TNF α基因能成功导入耐药细胞并获得表达。高表达TNF α的细胞克隆生长明显受抑。