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Myc/his-TDP-43融合蛋白对tau外显子10可变剪接的影响
引用本文:缪世琛,屈舒婷,陆颖,唐啸,任梁梁,顾建兰. Myc/his-TDP-43融合蛋白对tau外显子10可变剪接的影响[J]. 中国临床医学, 2018, 25(4): 568-572
作者姓名:缪世琛  屈舒婷  陆颖  唐啸  任梁梁  顾建兰
作者单位:南通大学医学院
基金项目:大学生创新创业计划国家级项目(201710304031Z),江苏省高校自然科学基金面上项目(16KJB310013),南通市市级科技计划项目(MS12015058),南通大学博士科研启动基金(15B30).
摘    要:目的:构建带myc/his标签的pcDNA3.1/TDP-43及其截断体质粒,探讨myc/his-TDP-43融合蛋白对tau外显子10可变剪接的影响。方法:采用PCR法扩增TDP-43基因及其各截断体,将扩增产物和载体pcDNA3.1双酶切后回收,连接载体和目的片段,获得重组质粒。在HEK-293FT细胞中转染pcDNA3.1/TDP-43·myc·his及其截断体质粒,Western印迹法检测相关蛋白的表达。TDP-43或siTDP-43和tau迷你基因SI9/SI10共转,RT-PCR检测TDP-43对tau外显子10可变剪接的影响。结果:成功构建了pcDNA3.1/TDP-43·myc·his全长及各截断体质粒,并在HEK-293FT细胞中检测到其蛋白表达。Myc/his-TDP-43融合蛋白可呈剂量依赖性促进4R-tau的表达(P0.05或0.01)。结论:Myc/his-TDP-43融合蛋白可促进4R-tau的表达,携带myc/his标签不影响TDP-43对tau外显子10可变剪接的促进作用,为后续研究奠定了基础。

关 键 词:反式激活反应DNA结合蛋白;tau蛋白;可变剪接;阿尔茨海默病

Effect of myc/his-TDP-43 fusion protein on alternative splicing of tau exon 10
MIAO Shi-chen,QU Shu-ting,LU Ying,TANG Xiao,REN Liang-liang,GU Jian-lan. Effect of myc/his-TDP-43 fusion protein on alternative splicing of tau exon 10[J]. Chinese Journal Of Clinical Medicine, 2018, 25(4): 568-572
Authors:MIAO Shi-chen  QU Shu-ting  LU Ying  TANG Xiao  REN Liang-liang  GU Jian-lan
Affiliation:School of Medicine, Nantong University, Nantong 226001, Jiangsu, China
Abstract:
Keywords:TDP-43   tau protein   alternative splicing   Alzheimer disease
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