补肾活血汤对大鼠骨髓间充质干细胞体外成骨分化影响的研究

目的 研究补肾活血汤对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外成骨分化的影响，并探讨Wnt/β-catenin信号通路在其中的调控作用。方法 将20只6周龄SD大鼠随机分为对照组和补肾活血汤组，分别给予生理盐水和补肾活血汤灌胃7 d后取血制备空白血清和含药血清。采用全骨髓培养法获取8周龄SD大鼠BMSCs,传至第3代用于实验研究。流式细胞仪检测BMSCs表型、纯度。实验分为3组：空白对照组细胞加入空白血清培养，补肾活血汤含药血清组细胞加入含药血清培养，经典成骨诱导剂组细胞加入含经典成骨诱导剂的空白血清培养。CCK-8法检测3组细胞干预1～4 d的增殖率，酶标仪检测3组细胞干预14 d后碱性磷酸酶活性，茜素红染色观察3组细胞干预21 d后成骨情况，RT-PCR法检测3组细胞干预21 d后Wnt/β-catenin信号通路相关因子(Wnt3a、β-catenin、CyclinD1、Runx2)mRNA表达情况。结果 第3代BMSCs纯度高。补肾活血方含药血清组干预3 d和4 d的细胞增殖率均明显高于同期空白对照组和经典成骨诱导剂组(P均<0.05);补肾活血方含药血清组和经典成骨诱导剂...