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泛素蛋白连接酶1在大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜中的表达及意义
引用本文:杨波,林新铎,王星人,唐俊明,杨建业,张蕾,曹腾,姜峰波,王家宁. 泛素蛋白连接酶1在大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜中的表达及意义[J]. 实验动物与比较医学, 2016, 0(3): 161-167. DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.03.001
作者姓名:杨波  林新铎  王星人  唐俊明  杨建业  张蕾  曹腾  姜峰波  王家宁
作者单位:1. 武汉大学人民医院心血管内科,武汉,430060;2. 湖北医药学院附属人民医院临床医学研究所,十堰,442000;3. 湖北医药学院附属人民医院神经内科,十堰,442000
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81270221)
摘    要:目的 研究胞质泛素蛋白连接酶1(KPC1)在大鼠颈动脉球囊损伤后的蛋白表达情况,探讨其在新生内膜形成过程中的生物学功能.方法 将成年雄性SD大鼠(450 ~ 500 g)随机分为假手术组和颈动脉球囊损伤模型组,建模后以左侧损伤动脉为实验组,同时以假手术组的左侧正常颈动脉为对照组.实验组大鼠于损伤后1d、3d、7d、14d、28d分别处死并取材,采用Western blot检测KPC1蛋白、内膜增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况,以qRT-PCR检测KPC1的mRNA表达,苏木精-伊红(HE)染色后比较内膜增生程度;采用体外培养血管平滑肌细胞(VSMC)建立增殖模型,运用Western blot及qRT-PCR检测其KPC1蛋白、KPC1 mRNA表达特征.结果 Western blot结果显示,颈动脉球囊损伤后实验组KPC1蛋白表达水平明显低于正常对照组(P<0.05),而PCNA蛋白表达量明显高于正常对照组(P<0.05);qRT-PCR检测结果显示,实验组KPC1的mRNA水平明显低于对照组(P<0.05);HE染色结果示颈动脉球囊损伤后1d、3d时光镜下血管内膜增生不明显;7d时光镜下可见新生内膜,增生的VSMC向内膜下迁移,管腔开始狭窄;14d时,可见明显新生内膜,VSMC排列紊乱,内弹力膜断裂,管腔明显狭窄,内膜厚度超过中膜;28d时,血管内膜继续不规则增生,血管腔狭窄程度继续加重,狭窄超过50%.体外培养并模拟VSMC增殖,提取细胞进行Western blot和qRT-PCR检测显示,KPC1蛋白、KPC1 mRNA表达在血小板源性生长因子-BB刺激增殖后开始逐渐减低.结论 抑制KPC1基因表达可促进损伤内膜增生,其作用机制可能与促进VSMC增殖有关.

关 键 词:胞质泛素蛋白连接酶1 (KPC1)  新生内膜  血管平滑肌细胞(VSMC)  增生

Expression and Role of KIP1 Ubiquitylation-promoting Complex 1 in Neointimal after Carotid Arteries Balloon Injury in Rats
Abstract:
Keywords:Kip1 ubiquitylation-promoting complex 1 (KPC1)  Neointima  Vascular smooth muscle cells (VSMCs)  Hyperplasia
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