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应用通用荧光引物筛选裸鼹鼠微卫星位点方法的建立
引用本文:林丽芳,李莉,肖邦,程继帅,杨文静,丛薇,赵善民,汤球,崔淑芳.应用通用荧光引物筛选裸鼹鼠微卫星位点方法的建立[J].实验动物与比较医学,2016(1):76-80.
作者姓名:林丽芳  李莉  肖邦  程继帅  杨文静  丛薇  赵善民  汤球  崔淑芳
作者单位:1. 第二军医大学实验动物中心,上海,200433;2. 第二军医大学教学保障处,上海,200433
基金项目:上海市科技发展基金,国家科技支撑计划项目
摘    要:目的 建立使用通用荧光引物分步PCR法筛选裸鼹鼠微卫星位点的方法.方法 在特异性引物F链的5'端连接通用引物,先以特异引物R链和加长引物F链进行PCR,再加入通用荧光引物进行第二步PCR,最后使用琼脂糖电泳和毛细管电泳检测扩增产物,同时以传统的荧光引物PCR为对照.结果 琼脂糖电泳结果显示,通用荧光引物PCR产生的目的片段清晰,引物特异性强,目的片段多态性与传统PCR产生的多态性一致,且片段大小均比传统PCR产生的目的片段大15 bp左右,与预期一致.毛细管电泳结果也显示,通用引物PCR结果检测的等位基因数与传统荧光引物PCR方法产生的数量完全一致,无杂带,扩增效率高,具有较强的可操作性.结论 使用通用荧光引物分步PCR法结果可应用于裸鼹鼠基因组大量微卫星位点的筛选.

关 键 词:裸鼹鼠  微卫星位点筛选  通用荧光引物  PCR

Establishment of PCR Method Using Fluorescence Labeled Universal Primers for Screening Microsatellite Loci in Naked Mole Rat
Abstract:
Keywords:Naked mole rat  Screening microsatellite loci  Fluorescent labeled universal primers  PCR
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