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左归丸对间充质干细胞向软骨细胞分化过程中Ⅱ型胶原及蛋白多糖基因表达的影响
引用本文:张前德,张缪佳,徐凌霄,王芳,谈文峰,郭敦明.左归丸对间充质干细胞向软骨细胞分化过程中Ⅱ型胶原及蛋白多糖基因表达的影响[J].中国中西医结合杂志,2011,31(12):1662-1668.
作者姓名:张前德  张缪佳  徐凌霄  王芳  谈文峰  郭敦明
作者单位:1. 南京医科大学第一附属医院风湿免疫科,南京,210029
2. 南京医科大学第一附属医院心脏科,南京,210029
3. 南京医科大学第一附属医院骨科,南京,210029
4. 南京医科大学第一附属医院中医科,南京,210029
基金项目:国家自然科学基金资助项目,国家中医药管理局青年科学基金资助项目,教育部博士点基金资助项目,亚太风湿病联盟青年基金
摘    要:目的观察左归丸含药血清对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向软骨细胞定向分化过程中MSCs增殖、Ⅱ型胶原及蛋白多糖基因表达的影响。方法分离培养大鼠MSCs,体外诱导其向软骨细胞分化,诱导同时分别以高(57 g/kg)、中(28.5 g/kg)、低(9.5 g/kg)浓度左归丸含药血清及大鼠空白血清刺激细胞。CCK-8法检测各组对MSCs增殖的影响。将第3代MSCs分为空白对照组(加入大鼠空白血清)、诱导对照组(加入诱导液及大鼠空白血清)及左归丸含药血清组(加入诱导液及中浓度左归丸含药血清),采用RT-PCR、免疫组织化学和Real-time PCR检测诱导分化软骨细胞中Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达。结果与空白对照组比较,不同浓度左归丸含药血清均能促进MSCs增殖(P〈0.05),其中以中浓度组最为明显(P〈0.05)。诱导第21天RT-PCR和免疫组织化学显示诱导对照组和左归丸含药血清组MSCs中均可见Ⅱ型胶原mRNA和蛋白表达,其中左归丸含药血清组中Ⅱ型胶原mRNA表达明显高于诱导对照组。Real-time PCR结果显示,诱导第21天左归丸含药血清组蛋白多糖mRNA相对表达定量分别约是第7、14天表达量的16倍和3倍(P〈0.05),并明显高于同期诱导对照组(P〈0.05)。结论左归丸含药血清能促进MSCs增殖、Ⅱ型胶原和蛋白多糖基因表达,可能是其软骨保护作用的分子基础之一。

关 键 词:左归丸  骨髓间充质干细胞  软骨细胞  骨关节炎

Effects of Zuogui Pill on the Gene Expressions of Typetiation of Mesenchymal Stem Cells towards Chondrocytes
Authors:XU Ling-xiao  WANG Fang and GUO Dun-ming
Institution:XU Ling-xiao,WANG Fang,GUO Dun-ming,et alDepartment of Rheumatology,First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University,Nanjing(210029)
Abstract:
Keywords:Zuogui Pill  mesenchymal stem cell  chondrocyte  osteoarthritis  
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