HPLC法测定二丁酰环磷腺苷钙原料药中的有关物质

建立了HPLC法测定二丁酰环磷腺苷钙(1)原料药中的有关物质，分别为2’-O-单丁酰环磷腺苷钠(3)、N⁶-单丁酰环磷腺苷钠(4)、环磷腺苷(5)。采用ODS Hypersil色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm)，以0.1 mol/L磷酸二氢钾溶液和甲醇(体积比600∶400)为流动相，检测波长为273 nm；柱温为30℃；流速为1.0 mL/min。建立了加校正因子的主成分自身对照法测定3种已知杂质，确定了3、4、5相对主成分的校正因子，分别是1.7、0.9、1.4。结果显示，二丁酰环磷腺苷钠(2)和3、4、5分别在0.1～20、4～20、1～20、0.1～2μg/mL内线性关系良好。3、4、5的平均加样回收率(n=2)分别为101.0%、98.5%、99.7%，精密度RSD(n=6)分别为0.1%、0.2%、0.1%，重复性RSD(n=6)分别为1.5%、1.6%、2.5%。3、4、5和1的检测限分别为0.2、0.1、0.1、0.2 ng。该方法专属性好、准确度和灵敏度高，为1的质量研究提供了参考。