三氧化二砷联合5-杂氮-2′-脱氧胞苷对U937细胞SHP-1、JAK3、TYK2基因表达的影响

目的 探讨甲基化抑制剂5-杂氮-2′-脱氧胞苷（5-Aza-2′-deoxycytidine，5-aza-CdR）联合三氧化 二砷（As2O3）对白血病细胞株U937中JAK3、TYK2和造血细胞磷酸酶SHP-1表达水平的影响，并探讨它 们在白血病发病中的作用。方法 5-aza-CdR、As2O3单用及联合处理U937细胞，5-aza-CdR浓度为0.5、1、2 μmol/L，As2O3的浓度为1、2.5、5 μmol/L，As2O3 1μmol/L + 5-aza-CdR 0.5μmol/L、As2O32.5 μmol/L + 5-aza- CdR 1 μmol/L、As2O3 35 μmol/L + 5-aza-CdR 2 μmol/L 及不加药物组，分别处理24、48、72 h后提取细胞总 RNA，荧光实时定量PCR（Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction，RQ-PCR）检测JAK3、TYK2 及SHP-1的表达。结果 As2O3和5-aza-CdR单独作用及两药合用时，SHP-1 mRNA在U937细胞中的表达呈 剂量及时间依赖性，其表达逐渐升高；JAK3 mRNA的表达呈剂量及时间依赖性，其表达逐渐降低；TYK2 mRNA的表达呈剂量及时间依赖性，其表达逐渐降低；SHP-1与JAK3、TYK2负相关，JAK3所受影响较 TYK2更为显著。结论 （1）甲基化抑制剂5-aza-CdR和As2O3可使SHP-1表达升高，JAK3、TYK2表达降 低，与浓度及作用时间有关。（2）SHP-1基因的重新表达与其发生去甲基化有关，对JAK/STAT通路有负调 控作用。