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新城疫病毒对人NK细胞表达TRAIL的促进作用
引用本文:殷君,王立芳,樊晓晖,梁莹,肖庆,宋德志,高灵茜,赖振屏.新城疫病毒对人NK细胞表达TRAIL的促进作用[J].肿瘤,2012,32(12):974-981.
作者姓名:殷君  王立芳  樊晓晖  梁莹  肖庆  宋德志  高灵茜  赖振屏
作者单位:广西医科大学基础医学院微生物学教研室,广西南宁,530021
基金项目:国家自然科学基金资助项目,广西自然科学基金资助项目,广西教育厅科学基金资助项目
摘    要:目的:研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)刺激自然杀伤(natural killer,NK)细胞产生肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)的作用机制。方法:采用免疫磁珠分选(magnetic activated cell sorting,MACS)法,分离得到高纯度的NK细胞;乳酸脱氢酶释放法检测NDV激活的NK细胞对人肝癌HepG2细胞的杀伤作用;实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)检测NDV刺激NK细胞4h后对TRAILmRNA表达水平的影响;FCM检测NDV刺激NK细胞16h时TRAIL蛋白的表达情况;ELISA法检测NDV刺激NK细胞后对其分泌干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的影响;最后采用抗IFN-γ抗体中和IFN-γ后,再采用FCM检测NDV刺激的NK细胞中TRAIL蛋白的表达情况。结果:FCM检测结果显示,分离得到的NK细胞的纯度达(90.60±1.15)%;NDV刺激NK细胞16h后,明显增强NK细胞的杀伤肿瘤作用,NDV效价为204.8HU刺激组的杀伤率达到(22.28±0.84)%;RFQ-PCR及FCM检测结果显示,不同效价的NDV刺激NK细胞后,NK细胞中TRAILmRNA及蛋白表达水平均明显升高;ELISA检测结果显示,NDV刺激NK细胞后IFN-γ的分泌水平明显增加,在NDV效价为25.6HU刺激16h时达到峰值(796.47±37.87)pg/mL;采用抗IFN-γ抗体中和IFN-γ后,NK细胞中TRAIL蛋白表达水平明显下降。结论:NDV刺激NK细胞后可增强IFN-γ的分泌水平,进而通过IFN-γ上调TRAIL的表达,此途径为NDV刺激NK细胞表达TRAIL的机制之一。此外,NDV直接刺激NK细胞表达TRAIL是另一条重要的途径。

关 键 词:肝肿瘤  实验性  新城疫病毒  免疫疗法  TNF相关凋亡诱导配体  自然杀伤细胞

Newcastle disease virus promotes expression of TNF-related apoptosis-inducing ligand in human NK cells
YIN Jun , WANG Li-fang , FAN Xiao-hui , LIANG Ying , XIAO Qing , SONG De-zhi , GAO Ling-xi , LAI Zhen-ping.Newcastle disease virus promotes expression of TNF-related apoptosis-inducing ligand in human NK cells[J].Tumor,2012,32(12):974-981.
Authors:YIN Jun  WANG Li-fang  FAN Xiao-hui  LIANG Ying  XIAO Qing  SONG De-zhi  GAO Ling-xi  LAI Zhen-ping
Institution:Department of Microbiology, School of Preclinical Medicine, Guangxi Medical University, Nanning 530021, Guangxi Province, China
Abstract:
Keywords:
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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