细胞因子参与抑制犬椎间盘退变细胞内炎症因子水平的体外实验研究

目的：评价白介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF-β）抑制退变椎间盘细胞释放炎症因子的有效性，探索细胞因子抑制退变椎间盘细胞释放炎症因子的潜在生物学机制。方法建立6条1岁龄比格犬针刺退变模型，2周后处死动物取出退变椎间盘髓核组织，体外分离培养。将培养的退变髓核细胞分为4组：20 ng/ml IL-10治疗组，20 ng/ml TGF-β治疗组，20 ng/ml IL-10联合20 ng/ml TGF-β治疗组，未治疗组；并以正常髓核细胞作为正常对照组。应用流式细胞仪于治疗后12、24、48 h时检测髓核细胞肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达量。结果治疗后12 h，正常髓核细胞组TNF-α的MFI值为7.92±0.32，IL-10治疗组为14.57±3.37，IL-10+TGF-β治疗组为11.9±2.91，均显著低于未治疗组（31.47±4.38，P<0.01）。治疗后24 h，IL-10治疗组为21.23±2.85，TGF-β治疗组为20.27±2.76， IL-10+TGF-β治疗组为12.9±2.91，均显著低于未治疗组（30.8±2.86，P<0.01），IL-10+TGF-β治疗组较IL-10治疗组及TGF-β治疗组显著降低（P<0.01）。而正常对照组与空白对照组差异无统计学意义。治疗后48 h，TGF-β治疗组与IL-10+TGF-β治疗组TNF-α阳性表达的细胞数达到最低水平，正常对照组TNF-α的MFI值为9.07±0.54，TGF-β治疗组为16.07±2.46，IL-10+TGF-β治疗组为12.3±4.42，均显著低于未治疗组（29.3±2.84，P<0.01）。结论 IL-10和TGF-β能够稳定地抑制TNF-α的表达，IL-10和TGF-β可能用于椎间盘退行性疾病的生物治疗。