环状非编码RNA hsa_circ_001842对肾癌细胞增殖、凋亡、侵袭和成瘤能力的影响

目的:探究环状非编码RNA hsa circ_001842作为癌基因在肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)患者肾癌组织及细胞中的表达情况,以及其对肾癌细胞增殖、凋亡、侵袭与成瘤能力的影响.方法:收集2018年9月至2019年10月绵阳市中心医院泌尿外科进行手术切除的肾癌标本及癌旁组织标本各64例.利用qRT-PCR检测所有RCC组织与癌旁正常组织中hsa circ_001842的表达情况.将Caki-1肾癌细胞分别转染hsa circ_001842基因过表达质粒(ox-circ_001842)、沉默质粒(sh-circ_001842)和空质粒(ox-NC和sh-NC),采用细胞克隆形成实验、流式细胞术、细胞划痕实验和细胞侵袭实验,检测hsa_circ_001842对肾癌细胞增殖凋亡和迁移侵袭能力的影响.使用Western blot检测各组肾癌细胞上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关蛋白与MMP-9蛋白表达水平.将转染sh-NC和sh-circ_001842的Caki-1肾癌细胞分别接种于裸鼠皮下,每7天测量一次肿瘤体积及体质量,4周后处死各组小鼠,并使用免疫组化技术和qRT-PCR检测肿瘤组织中EMT相关蛋白的表达情况.结果:RCC患者肾癌组织中hsa_circ_001842的表达量明显高于癌旁正常组织(P＜0.05).体外实验表明,与ox-NC组和sh-circ_001842组相比,ox-circ_001842组和sh-NC组Caki-1肾癌细胞的集落形成率、划痕愈合比率、细胞侵袭能力和E-cadherin蛋白的表达均明显增加(P＜0.05),而细胞凋亡率、N-cadherin和MMP-9蛋白的表达明显降低(P＜0.05).裸鼠成瘤实验表明,与sh-NC组相比,sh-circ_001842组裸鼠形成的肿瘤体积和体质量均小于sh-NC组形成的肿瘤(P＜0.05),并且E-cadherin蛋白表达水平明显上升,N-cadherin蛋白表达水平明显下降(P＜0.05).结论:hsa_circ_001842在肾癌组织及细胞中表达上调,抑制hsa circ_001842的表达可以抑制癌细胞的增殖、迁移、侵袭和成瘤能力.

Effects of circular non-coding RNA hsa_circ_001842 on proliferation,apoptosis,invasion and tumorigenicity of renal cancer cells