夹脊电针对脊髓损伤大鼠P2X7R/NLRP3信号通路相关蛋白的影响的实验研究

摘要：目的：观察夹脊电针对脊髓损伤大鼠P2X7R/NLRP3信号通路NLRP3蛋白、NLRP3mRNA及NLRP3/OX42的共定位表达的影响，为夹脊电针在临床中治疗脊髓损伤提供实验理论依据。方法：将120只SD大鼠随机分为5组，即假手术组、模型组和夹脊电针组、P2X7R干扰组、干扰对照组，每组根据不同时间点分为1d、3d、7d、21d四个亚组，每个亚组6只，假手术组仅暴露大鼠脊髓，模型组采用改良Allen’s打击法制备SCI大鼠模型，夹脊电针组于模型组基础上给予夹脊电针治疗，P2X7R干扰组于模型制备基础上注射P2X7RsiRNA干扰病毒，干扰对照组同上法注射阴性对照病毒，选取BBB评分1-3分者纳入本实验。各组大鼠在相应时间治疗后再次进行BBB评分，然后处死并取材。用Western blot法检测NLRP3蛋白的表达，用Realtime-PCR检测各组大鼠脊髓组织NLRP3 mRNA的表达，用免疫荧光双染法观察NLRP3与OX42共定位表达。实验结果用SPSS20.0统计分析软件进行处理。结果：BBB评分结果显示，各时间点模型组BBB评分较假手术组显著降低（P＜0.05），夹脊电针治疗后BBB评分明显升高（P＜0.05）；术后3d、7d、21d，假手术组、夹脊电针组和P2X7R干扰组NLRP3蛋白表达量均低于模型组（P＜0.05），干扰对照组NLRP3蛋白表达量高于P2X7（P＜0.05）；各时间点模型组NLRP3mRNA较假手术组均升高显著（P＜0.05），夹脊电针治疗后在7d、21d时NLRP3mRNA表达水平明显低于模型组（P＜0.05），在3d、7d、21d时，P2X7干扰组NLRP3mRNA表达水平低于干扰对照组（P＜0.05），高于模型组（P＜0.05）；术后各时间点模型组NLRP3与OX42共定位阳性表达较假手术组明显增多， 3d、7d、21d时夹脊电针组NLRP3与OX42共定位阳性表达明显低于Model组。结论：夹脊电针能降低脊髓损伤大鼠NLRP3蛋白、NLRP3mRNA及NLRP3/OX42的共定位表达，减轻脊髓损伤大鼠炎症反应，改善脊髓损伤大鼠运功功能。