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稳定表达人水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4的建立及应用
引用本文:刘俊秀,孙巧松,丰岩清,曾缨,赖蓉,陈曦,黄帆. 稳定表达人水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4的建立及应用[J]. 中山大学学报(医学科学版), 2010, 31(6)
作者姓名:刘俊秀  孙巧松  丰岩清  曾缨  赖蓉  陈曦  黄帆
基金项目:教育部高等学校博士学科点专项科研基金新教师课题,中山大学医科青年教师科研启动基金,广东省医学科研基金
摘    要:[目的]建立一种可临床应用的并能稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4,用于检测视神经脊髓炎患者血清中的AQP4抗体.[方法]构建有AQP4基因的表达载体,利用脂质体将载体转入HEK293细胞,G418筛选,RT-PCR、间接免疫荧光检测稳定细胞系中水通道蛋白4的表达及分布.细胞间接免疫荧光检测20例NMO患者、20例MS患者、30例健康对照血清中的AQP4抗体,并同鼠脑间接免疫荧光检测法比较.[结果]限制性酶切消化、PCR、测序结果证明载体构建成功.间接免疫荧光证实稳定细胞系中有AQP4表达.且主要分布在细胞膜上.20例NMO患者血清中11例NMO-IgG阳性,18例AQP4抗体阳性,滴度在1:60-1:15 360之间,而MS患者仅检测到1例阳性,健康对照未检测到阳性.[结论]成功构建稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4,并检测出国人NMO患者血清中存在AQP4抗体,且敏感性高于鼠脑法,可以有效的鉴别视神经脊髓炎和多发性硬化.

关 键 词:视神经脊髓炎  NMO-IgG  水通道蛋白4(AQP4)  HEK293

Establishment and Evaluation of a Human Embryonic Kidney Epithelial Cell Line HEK293/AQP4 Stably Express Human AQP4
LIU Jun-xiu,SUN Qiao-song,FENG Yan-qing,ZENG Ying,LAI Rong,CHEN Xi,HUANG Fan. Establishment and Evaluation of a Human Embryonic Kidney Epithelial Cell Line HEK293/AQP4 Stably Express Human AQP4[J]. Journal of Sun Yatsen University(Medical Sciences), 2010, 31(6)
Authors:LIU Jun-xiu  SUN Qiao-song  FENG Yan-qing  ZENG Ying  LAI Rong  CHEN Xi  HUANG Fan
Abstract:
Keywords:
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