| RGD-TAT-KDRsiRNA慢病毒载体构建及抗肿瘤活性 |
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| 引用本文： | 张俭丽, 郑旭, 王杰. RGD-TAT-KDRsiRNA慢病毒载体构建及抗肿瘤活性[J]. 中国公共卫生, 2015, 31(5): 594-597. DOI: 10.11847/zgggws2015-31-05-15 |
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| 作者姓名： | 张俭丽 郑旭 王杰 |
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| 作者单位： | 1.沈阳医学院附属卫生学校基础护理教研室, 辽宁 沈阳 110034;2.沈阳市和平区疾病预防控制中心;3.沈阳医学院继续教育学院 |
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| 基金项目： | 辽宁省自然科学基金(201102214);沈阳市科技局科技计划项目(F11-264-1-29) |
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| 摘 要： | 目的构建精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD)介导的穿膜肽(TAT)-血管内皮细胞生长因子受体(KDR) siRNA融合基因慢病毒载体, 探讨其对人肺癌A549细胞的抑制效果。方法设计合成编码RGD的2条寡核苷酸链, 克隆到pGC/TAT-KDR siRNA载体的TAT下游, 构建TAT-RGD-KDR siRNA融合基因载体;慢病毒包装并感染A549细胞;通过Western blot和real-time PCR检测A549细胞KDR基因表达水平;通过噻唑蓝法、双色法流式细胞仪和Transwell侵袭实验检测KDR基因沉默对A549细胞凋亡和侵袭力的影响。结果测序和Blast比对证实重组载体中的RGD序列与设计一致;TAT-RGD-KDR siRNA融合基因慢病毒载体转染A540细胞KDR mRNA和蛋白表达水平分别为(22.7±3.9)%和(19.3±2.7)%, 明显低于TAT-KDR siRNA融合基因慢病毒载体转染组, 差异有统计学意义(P<0.01);该载体具有较强的抑制A549细胞增殖、促进细胞凋亡和抑制细胞体外侵袭力的作用。结论TAT-RGD-KDR siRNA融合基因慢病毒载体通过抑制细胞KDR mRNA和蛋白表达, 抑制A549细胞增殖和侵袭、促进细胞凋亡。
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| 关 键 词： | 精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD) 穿膜肽(TAT) 血管内皮细胞生长因子受体(KDR) TAT-RGD-KDR siRNA融合基因 慢病毒载体 |
| 收稿时间： | 2014-07-01 |
Lentiviral vector construction of RGD-TAT-KDR siRNA fusion gene and assessment of its antitumor activity |
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| ZHANG Jian-li, ZHENG Xu, WANG Jie. Lentiviral vector construction of RGD- TAT-KDR siRNA fusion gene and assessment of its antitumor activity[J]. Chinese Journal of Public Health, 2015, 31(5): 594-597. DOI: 10.11847/zgggws2015-31-05-15 |
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| Authors: | ZHANG Jian-li ZHENG Xu WANG Jie |
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| Affiliation: | 1.Department of Basic Nursing, Affiliated Health School, Shenyang Medical College, Shenyang, Liaoning Province 110034, China |
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