| 流行性乙型脑炎病毒E蛋白基因在大肠杆菌中的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 王丽,李洪,张志霞,刘晓燕,谢华福,宋杰,梅志强.流行性乙型脑炎病毒E蛋白基因在大肠杆菌中的克隆与表达[J].泸州医学院学报,2008,31(3):269-272. |
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| 作者姓名： | 王丽 李洪 张志霞 刘晓燕 谢华福 宋杰 梅志强 |
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| 作者单位： | 泸州医学院医学分子生物学实验室,四川泸州,646000 |
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| 摘 要： | 目的;获得JEV E蛋白基因,构建重组表达载体并在E.coli中高效表达.方法:参照GeneBank中的日本乙型脑炎病毒SA14-14株序列设计一对特异性引物,采用RT-PCR法扩增E基因全长,克隆至PUCm-T载体,经测序证实后克隆至原核表达载体pET32a中,转化入BL21(DE3),IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析.结果:限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析表明,扩增出了JEV E蛋白基因全长1500bp,成功构建了重组质粒pET-32a/JEV E,SDS-PAGE分析显示目的蛋白主要以包涵体的形式在大肠杆菌中获得表达,表达量占总菌体蛋白的35%.结论:在大肠杆菌中成功表达了JEV E蛋白,为ELISA早期诊断试剂盒的研制和E蛋白基因结构与功能的分析奠定了基础.
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| 关 键 词： | 流行性乙型脑炎病毒 E蛋白基因 反转录-聚合酶链反应 基因克隆 表达载体 |
CLONING AND EXPRESSION OF JAPANESE ENCEPHALITIS VIRUS E GENE IN ESCHERICHIA COLI |
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| Wang Li,et al Laboratory of Medical Molecular Biology,Luzhou Medical College.CLONING AND EXPRESSION OF JAPANESE ENCEPHALITIS VIRUS E GENE IN ESCHERICHIA COLI[J].Journal of Luzhou Medical College,2008,31(3):269-272. |
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| Authors: | Wang Li Laboratory of Medical Molecular Biology Luzhou Medical College |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Japanese encephalitis virus JEV E gene RT-PCR Gene cloning Expression vector |
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