| 乙型肝炎病毒前-X蛋白在大肠埃希菌中的表达及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 张延峰,成军,洪源,王琦.乙型肝炎病毒前-X蛋白在大肠埃希菌中的表达及多克隆抗体的制备[J].解放军医学杂志,2008,33(7):801-802. |
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| 作者姓名： | 张延峰 成军 洪源 王琦 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院,北京,100850
2. 北京地坛医院传染病研究所 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的在大肠埃希菌中表达乙型肝炎病毒(HBV)前-X蛋白,纯化、鉴定并制备多克隆抗体。方法通过PCR技术获得HBV前-X编码基因片段,克隆至载体pET32a( ),构建原核表达重组质粒,转化至大肠埃希菌中诱导表达,表达产物进行Ni 亲和层析纯化,经Western blotting证实该蛋白的免疫原性,然后免疫新西兰兔获得多克隆抗体并经ELISA实验测定效价,经Western blotting证实其免疫反应特异性。结果成功构建原核表达载体并在大肠埃希菌中高效表达,表达产物主要以包涵体形式存在,融合蛋白的相对分子量约为25kD,Western blotting结果表明目的蛋白具有特异性的免疫反应识别。成功获得前-X蛋白的多克隆抗体,ELISA检测抗体效价为>1:128000,Western blotting实验证实获得的抗体能发生特异性免疫反应。结论成功完成了HBV前-X蛋白的体外表达及多克隆抗体制备,为检测前-X蛋白在乙型肝炎患者体内的表达及进一步研究其生物学特性奠定了实验基础。
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| 关 键 词： | 肝炎 乙型 慢性 原核表达 前-X蛋白 |
Expression and polyclonal antibody preparation of HBV pre-X protein |
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| Zhang Yanfeng,Cheng Jun,Hong Yuan,et al..Expression and polyclonal antibody preparation of HBV pre-X protein[J].Medical Journal of Chinese People's Liberation Army,2008,33(7):801-802. |
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| Authors: | Zhang Yanfeng Cheng Jun Hong Yuan |
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| Institution: | Zhang Yanfeng,Cheng Jun,Hong Yuan,et al. Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100011,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatitis B chronic prokaryotic expression pre-X protein |
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