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同型半胱氨酸对FABP 4 启动子活性的影响
引用本文:熊建团,李旭生,杨安宁,杨松昊,邓梅,王磊,高源,李南,杨晓玲,贾月霞,姜怡邓. 同型半胱氨酸对FABP 4 启动子活性的影响[J]. 中国现代医学杂志, 2018, 28(29): 25-30
作者姓名:熊建团  李旭生  杨安宁  杨松昊  邓梅  王磊  高源  李南  杨晓玲  贾月霞  姜怡邓
作者单位:(1. 宁夏医科大学 药学院,宁夏 银川 750004 ;2. 宁夏医科大学总医院 骨科,宁夏 银川750004 ;3. 宁夏医科大学 基础医学院,宁夏 银川 750004)
基金项目:国家自然科学基金(No :81560084);宁夏自然科学基金(No :NZ16063);宁夏高等学校科学研究项目(No :NGY2016087)
摘    要:目的 通过克隆脂肪酸结合蛋白4(FABP4)基因启动子,确定其活性核心区和功能片段,分析心血管疾病独立危险因子同型半胱氨酸(Hcy)对FABP 4 启动子活性的影响。方法 应用生物信息学预测FABP 4 基因启动子区顺式转录作用元件和反式作用因子,以pGL3-Basic 为载体,采用基因重组法构建启动子截取片段,转染HEK-293A 细胞,观察不同截取片段的荧光素酶活性变化,确定活性最强的片段。进一步将核心启动子片段(-2000/-1)转染巨噬细胞,观察不同浓度Hcy 和DNA 甲基化抑制剂5- 氮杂胞苷(AZC)对FABP 4 基因启动子活性的影响。结果 不同长度截取片段转染HEK-293A 细胞后检测荧光素酶活性结果显示,与pGL3 对照组比较,-2000/-1 片段转录活性最强。将核心启动子片段(-2000/-1)转染巨噬细胞并用不同浓度Hcy 干预后,与0μmol/L Hcy 组比较,100 和200μmol/L Hcy 组启动活性升高;与100μmol/LHcy 组比较,在100μmol/L Hcy 基础上用AZC 干预后,FABP 4 基因启动活性升高(P <0.05)。结论 成功克隆FABP 4 启动子的4 个片段,且确定FABP 4 基因核心启动子位于-2000/-1 片段;Hcy 可以促进FABP 4 基因核心启动子片段活性,补充AZC 后可以进一步促进Hcy 引起的FABP 4 启动子活性升高。

关 键 词:FABP 4 ;启动子活性;同型半胱氨酸
收稿时间:2018-05-15

Effect of homocysteine on activity of human FABP4 promoterin macrophages
Jian-tuan Xiong,Xu-sheng Li,An-ning Yang,Song-hao Yang,Mei Deng,Lei Wang,Yuan Gao,Nan Li,Xiao-ling Yang,Yue-xia Ji,Yi-deng Jiang. Effect of homocysteine on activity of human FABP4 promoterin macrophages[J]. China Journal of Modern Medicine, 2018, 28(29): 25-30
Authors:Jian-tuan Xiong  Xu-sheng Li  An-ning Yang  Song-hao Yang  Mei Deng  Lei Wang  Yuan Gao  Nan Li  Xiao-ling Yang  Yue-xia Ji  Yi-deng Jiang
Affiliation:(1. College of Pharmacy, Ningxia Medical University, Yinchuan, Ningxia 750004, China; 2. Departmentof Orthopedics, General Hospital of Ningxia Medical University, Yinchuan, Ningxia 750004, China;3. Basic Medical College, Ningxia Medical University, Yinchuan, Ningxia 750004, China)
Abstract:
Keywords:FABP4   promoter activity   homocysteine   macrophage
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