IFN-γ在小鼠造血调节中的作用

本研究旨在探讨IFN-γ在小鼠骨髓造血调节中的作用及其作用机制。通过RT—PCR方法扩增小鼠IFN-γ（mIFN-y）片段，构建mIFN-γ慢病毒表达载体pCDH1-mIFN-γ-copGFP（pCDH-mIFN-γ-GFP）。将pCDH-mIFN-γ-GFP和pCDH-EF1-copGFP（pCDH-GFP）分别与辅助质粒pPACK—A、pPACK—B、pPACK—C组合，通过磷酸钙沉淀法转染293T细胞，制备慢病毒。通过慢病毒将mIFN-γ和GFP转导至C57BL／6J雄性小鼠的骨髓单个核细胞，接种于M3434甲基纤维素完全培养基进行集落形成试验，同时将其通过尾静脉注射给致死剂量照射的受体C57BL／6J小鼠体内，定期进行血常规检查。结果显示，成功构建pCDH-mIFN-γ-GFP慢病毒载体；转导mIFN-γ的293T细胞分泌mIFN-γ蛋白；转导mIFN-γ的小鼠骨髓单个核细胞集落生成数量较对照组显著减少，集落形成能力下降；mIFN-γ组的骨髓移植小鼠血象恢复较GFP对照组延迟，移植后8周流式细胞术检测外周血仍可见GFP阳性细胞。结论：mIFN-γ降低了造血干／祖细胞的增殖能力，延缓骨髓移植小鼠的造血恢复时间。