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应用PCR-RFLP技术进行乙型流感病毒鉴别的实验研究
引用本文:姚栩,张彩云,陈智伟,杨建娜,郑能雄. 应用PCR-RFLP技术进行乙型流感病毒鉴别的实验研究[J]. 中国卫生检验杂志, 2007, 17(11): 1948-1950
作者姓名:姚栩  张彩云  陈智伟  杨建娜  郑能雄
作者单位:福州市疾病预防控制中心,福州,350004
基金项目:福建省卫生系统学术技术带头人项目
摘    要:目的:应用聚合酶链反应(PCR)连接的限制性片段长度多态性(RELP)技术进行乙型流感病毒及其巴拿马株与维多利亚株两大谱系的鉴别。方法:根据GenBank中登录乙型流感病毒血凝素(HA)区域的核苷酸序列,应用软件进行序列比对,根据HA基因的保守区设计、筛选引物,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增流感病毒HA基因,用限制性内切酶H indⅢ酶切扩增产物并进行琼脂糖凝胶电泳,同时对检测方法进行特异性和灵敏性实验。结果:该方法对乙型流感病毒有特异性,与甲1和甲3型流感病毒无交叉反应。维多利亚株和巴拿马株HA基因均能被特异性引物所扩增,扩增产物经H indⅢ酶切后,乙型流感病毒巴拿马株在电泳谱上出现603 bp与242 bp的两个可见片段,而维多利亚株因无H indⅢ酶切位点,仍呈872 bp的一个片段。该方法检测敏感度可达0.1 TC ID50。结论:该方法是一种灵敏度高、特异性强的乙型流感病毒维多利亚株与巴拿马株鉴别的方法。

关 键 词:乙型流感病毒  限制性片段长度多态性  聚合酶链反应  鉴别
文章编号:1004-8685(2007)11-1948-03
收稿时间:2007-08-01
修稿时间:2007-08-01

Differentiation of influenza B viruses by PCR - RFLP assay
Yao Xu,Zhan Cai-yun,Chen Zhi-wei,Yang Jian-na,Zheng Neng-xiong. Differentiation of influenza B viruses by PCR - RFLP assay[J]. Chinses Journal of Health Laboratory Technology, 2007, 17(11): 1948-1950
Authors:Yao Xu  Zhan Cai-yun  Chen Zhi-wei  Yang Jian-na  Zheng Neng-xiong
Affiliation:Fuzhou Center for Disease Control and Prevention, Fuzhou 350004, China
Abstract:
Keywords:Influenza B virus  RFLP  PCR  Differentiation
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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