周围神经损伤后断端神经组织微小RNA-221和PTEN表达变化

目的研究大鼠坐骨神经损伤后近、远侧断端组织中微小RNA-221(microRNA-221,miR-221)以及磷酸酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tension protein homologue,PTEN)的表达情况,及其与周围神经损伤修复的相关性,以期为临床诊治周围神经损伤提供新靶点。方法取SPF级雄性SD大鼠96只建立坐骨神经损伤模型,分别于术后0(术后即刻)、1、4、7 d处死24只大鼠,无菌条件下取坐骨神经近、远侧断端组织。实时荧光定量PCR检测miR-221表达,Western blot、免疫荧光染色检测PTEN蛋白表达,采用双荧光素酶报告基因验证miR-221与PTEN的调控关系;同时结合透射电镜观察神经组织超微结构。结果实时荧光定量PCR、Western blot及免疫荧光染色检测示,术后大鼠坐骨神经近、远侧断端组织中miR-221相对表达量均逐渐增加,PTEN蛋白相对表达量均逐渐减少,术后各时间点间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。术后1、4、7 d近侧断端miR-221相对表达量均显著高于远侧断端,PTEN蛋白相对表达量均显著低于远侧断端,差异均有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因示PTEN为miR-221作用靶点。透射电镜观察示随术后时间延长,雪旺细胞增殖及轴突、髓鞘溃变逐渐增加;术后1 d近、远侧断端无明显差异,4、7 d时近侧断端雪旺细胞增殖较远侧断端增多,轴突、髓鞘溃变程度降低。结论大鼠坐骨神经损伤后,miR-221表达上调,靶向调控PTEN表达降低,进而产生近、远侧断端miR-221及PTEN表达差异,这一现象可能对促进周围神经损伤后修复发挥一定作用。

Changes in expression of microRNA-221 and phosphatase and tension protein homologue in nerve stump after peripheral nerve injury

ZHANG Chenming;LI Yu;ZHANG Yuqiang;CAO Yu;GONG Chao;WANG Chenliang;WANG Wei(Department of Orthopedics,the First Affiliated Hospital ofjinzhou Medical University,Jinzhou Liaoning,121000,P.R.China;Graduate School of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Shenyang Liaoning,110016,P.R.China;Liaoning Provincial Key Laboratory of Medical Tissue Engineering,Jinzhou Liaoning,121000,P.R.China;Institute of Extra-orbital Sciences,Jinzhou Medical University,Jinzhou Liaoning,121000,P.R.China)