| 增强型绿色荧光蛋白兔多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 方莉,陈雪梅,任秀花,闫志勇,臧卫东. 增强型绿色荧光蛋白兔多克隆抗体的制备[J]. 郑州大学学报(医学版), 2010, 45(1) |
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| 作者姓名： | 方莉 陈雪梅 任秀花 闫志勇 臧卫东 |
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| 作者单位： | 郑州大学医院检验科郑州450052;郑州大学基础医学院人体解剖学教研室,郑州,450001 |
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| 摘 要： | 目的:制备增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的兔多克隆抗体.方法:用谷胱甘肽-增强型绿色荧光蛋白(GST-EGFP)融合抗原加福氏完全佐剂背部皮内注射首次免疫新西兰大白兔,第28天用GST-EGFP融合抗原加福氏不完全佐剂同样剂量加强免疫,第35天时再次免疫.第49天心脏采血30 mL,4℃静置过夜,收集血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗血清中EGFP多克隆抗体的效价;免疫印迹法检测EGFP多克隆抗体的特异性;利用荧光免疫细胞化学检测该抗体和观察转染EGFP贴壁生长的大鼠脑皮层混合培养细胞中EGFP的表达.结果:ELISA检测EGFP多克隆抗体滴度最高为1:9 549;免疫印迹检测结果显示该抗体特异性高;荧光免疫细胞化学检测显示存混合培养细胞中EGFP呈阳性表达.结论:直接使用GST-EGFP融合蛋白免疫新西兰大白兔,可在较短时间内制备大量EGFP多克隆抗体.
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| 关 键 词： | 增强型绿色荧光蛋白 多克隆抗体 兔 |
Preparation of polyclonal antibody of enhanced green fluorescent protein in rabbits |
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| FANG Li , CHEN Xuemei , REN Xiuhua , YAN Zhiyong , ZANG Weidong. Preparation of polyclonal antibody of enhanced green fluorescent protein in rabbits[J]. Journal of Zhengzhou University: Med Sci, 2010, 45(1) |
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| Authors: | FANG Li CHEN Xuemei REN Xiuhua YAN Zhiyong ZANG Weidong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | enhanced green fluorescent protein polyclonal antibody rabbit |
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