小分子干扰RNA介导RhoA沉默优化骨髓间充质干细胞的培养 |
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引用本文: | 吕刚,姚鑫.小分子干扰RNA介导RhoA沉默优化骨髓间充质干细胞的培养[J].中国神经再生研究,2010,14(45):8365-8368. |
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作者姓名: | 吕刚 姚鑫 |
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作者单位: | 天津医科大学研究生院,天津市 300000,天津市环湖医院神经外科,天津市300000 |
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摘 要: | 以往骨髓间充质干细胞的培养方法存在衰老和分化率低等问题。
目的:检测是否可以通过沉默RhoA基因的方法优化骨髓间充质干细胞培养。
方法:体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,经小分子干扰RNA转染以沉默RhoA基因表达,分为3组培养:干细胞组(未转染小分子干扰RNA)、经随机打乱顺序的小分子干扰RNA 转染干细胞组、经小分子干扰RNA 转染的干细胞组。用RT-PCR,Western blot检测骨髓间充质干细胞在转染前后RhoA基因和蛋白的表达。应用细胞生长曲线、MTT比色法观察细胞生长的优化作用,采用流式细胞术测定细胞周期分布的变化。
结果与结论:与干细胞组、经随机打乱顺序的小分子干扰RNA 转染干细胞组比较,经小分子干扰RNA 转染的干细胞组RhoA基因和蛋白表达量明显降低(P < 0.05),细胞的生长速度明显增快,细胞周期G0/G1期减少,S期细胞数增多(P < 0.05)。说明通过沉默RhoA基因的方法可以促进骨髓间充质干细胞增殖,优化培养方法。
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关 键 词: | 细胞培养 骨髓间充质干细胞 RhoA RNA干扰 干细胞培养 |
Optimization of small interfering RNA-mediated RhoA silencing in bone marrow mesenchymal stem cell cultures |
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Institution: | Postgraduate College, Tianjin Medical University, Tianjin 300000, China,Department of Neurosurgery, Huanhu Hospital of Tianji, Tianjin 300000, China |
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Abstract: | |
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Keywords: | cultures RhoA RNA interference bone mesenchymal stem cells |
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