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中药成分CDP对乳腺癌细胞P16,E-CADHERIN去甲基化作用的研究
引用本文:柴新娟,栾菊,杨文理,张迎春,葛亚俊,覃扬.中药成分CDP对乳腺癌细胞P16,E-CADHERIN去甲基化作用的研究[J].四川大学学报(医学版),2009,40(5).
作者姓名:柴新娟  栾菊  杨文理  张迎春  葛亚俊  覃扬
作者单位:四川大学华西基础医学与法医学院,生物化学与分子生物学教研室,成都,610041
摘    要:目的 探讨中药成分CDP对乳腺癌细胞系T47D和MDA-MB-435的抑癌基因P16和E-CADHERIN启动子区CpG岛的去甲基化作用.方法 培养人乳腺癌细胞系 T47D和MDA-MB-435, 分别用不同剂量、同一剂量不同时间的CDP和5-azacytidine (5-aza-C) 处理细胞;用甲基化特异性PCR(MSP)和半定量RT-PCR,检测细胞中P16和E-CADHERIN基因的甲基化改变和RNA表达恢复情况.结果 ①在25、50、75和100 μmol/L剂量的CDP持续作用6 d后,T47D细胞P16基因启动子区CpG岛甲基化特异性条带减弱,在100 μmol/L剂量时消失,在4个剂量CDP作用下,非甲基化特异性条带均重新出现;在75和100 μmol/L浓度作用下时,T47D细胞中出现P16基因重新表达;②在50 μmol/L CDP作用144 h后,T47D P16基因启动子区CpG岛甲基化特异性条带仍存在;非甲基化特异性条带24 h出现并持续到144 h;在药物作用144 h时,P16出现表达.③在MDA-MB-435细胞中,用不同剂量CDP处理或同一剂量CDP处理不同时间后,均未观察到E-CADHERIN非甲基化条带的出现,RT-PCR也未检测到E-CADHERIN基因的表达. 结论在T47D细胞中,中药成分CDP可以剂量、时间依赖的形式逆转高甲基化的P16基因,而对MDA-MB-435细胞中高甲基化的E-CADHERIN基因无效,提示CDP药物存在靶分子反应多样性.

关 键 词:中药成分CDP  去甲基化

Traditional Medicine CDP and Promoter Demethylation in Breast Cancer Cell Lines
CHAI Xin-juan,LUAN Ju,YANG Wen-li,ZHANG Ying-chun,GE Ya-jun,QIN Yang.Traditional Medicine CDP and Promoter Demethylation in Breast Cancer Cell Lines[J].Journal of West China University of Medical Sciences,2009,40(5).
Authors:CHAI Xin-juan  LUAN Ju  YANG Wen-li  ZHANG Ying-chun  GE Ya-jun  QIN Yang
Abstract:
Keywords:P16  E-CADHERIN  T47D  MDA-MB-435
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