| 膀胱逼尿肌中肾上腺素能β2受体基因克隆与反义真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 李刚,孙长成,郑晓华,李凯,宫大鑫,刘屹立,王平.膀胱逼尿肌中肾上腺素能β2受体基因克隆与反义真核表达载体的构建[J].中华泌尿外科杂志,2004,25(6):368-370. |
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| 作者姓名： | 李刚 孙长成 郑晓华 李凯 宫大鑫 刘屹立 王平 |
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| 作者单位： | 1. 110001,沈阳,中国医科大学第一临床学院泌尿外科
2. 解放军第二零二医院综合内科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目资助 (3 0 170 3 5 2 ) |
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| 摘 要： | 目的 克隆人膀胱逼尿肌中肾上腺素能 β2 受体基因全长 ,构建其反义真核表达载体。 方法 采用RT PCR法从人膀胱逼尿肌中扩增出 β2 AR的全长cDNA序列 ,上游引物 5′端加有BamHⅠ及ClaⅠ酶切位点 ,下游引物加有HindⅢ酶切位点 ,将该片段插入pUC19载体中 ,用ClaI和HindⅢ切下目的基因 ,然后将目的片段反向插入逆转录病毒表达载体pLNCX上。对重组子进行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定。 结果 所克隆的目的基因约为 1.2kb ,并成功连接到逆转录病毒载体pLNCX上 ,测序证明 ,插入的目的片段碱基序列与Genebank报道的完全一致 ,且插入载体方向正确。 结论 成功克隆了人逼尿肌中肾上腺素能 β2 受体基因的全长cDNA序列 ,构建了反义真核表达载体 ,为研究 β2 AR亚型的功能及进一步研究膀胱功能障碍的药物治疗提供了实验依据。
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| 关 键 词： | 受体 肾上腺素能β2 真核表达载体 反义基因 |
| 修稿时间： | 2003年12月19 |
β2-AR gene cloning from human detrusor cell and the construction of its antisense eukaryotic expression vector |
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| LI Gang ,SUN Chang-cheng,ZHENG Xiao-hua,et al..β2-AR gene cloning from human detrusor cell and the construction of its antisense eukaryotic expression vector[J].Chinese Journal of Urology,2004,25(6):368-370. |
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| Authors: | LI Gang SUN Chang-cheng ZHENG Xiao-hua |
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| Institution: | LI Gang *,SUN Chang-cheng,ZHENG Xiao-hua,et al. *Department of Urology,First Affiliated Hospital of China Medical University,Shenyang 110001,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Receptors adrenergic beta-2 Eukaryotic expression vector Antisense gene |
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