| 平榛主要过敏原Cor h 1的克隆表达、纯化及免疫学鉴定 |
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| 引用本文： | 莫绪成,吴序栎,刘志刚.平榛主要过敏原Cor h 1的克隆表达、纯化及免疫学鉴定[J].免疫学杂志,2009,25(2). |
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| 作者姓名： | 莫绪成 吴序栎 刘志刚 |
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| 作者单位： | 深圳大学过敏反应与免疫学研究所,广东,深圳,518060
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| 基金项目： | 广东省科技重点专项基金，深圳市科技计划项目，深圳大学校基金 |
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| 摘 要： | 目的 克隆、表达榛(平榛)主要变应原基因Cor h 1,检测其免疫学活性.方法 提取平榛的总RNA,设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR方法 扩增目的基因,将其克隆入T载体中进行测序和分析.采用RT-PCR获得整个短的开放阅读框并将目的基因克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中进行表达.通过Ni2+亲和层析,对重组蛋白进行纯化,采用免疫印迹(Western-blot)方法 检测其lgE结合活性.结果 克隆获得了平榛的主要过敏原Cor h 1的基因,该基因被GenBank收录,登陆号为EU195058.基因开放阅读框为486个碱基(包括终止密码子),编码161个氨基酸.该序列编码的蛋白等电点为6.16,相对分子质量约为17 600.结论 成功地克隆和表达了平榛主要变应原Car h 1,蛋白具有良好的免疫原性.
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| 关 键 词： | 平榛 基因克隆 表达 |
Cloning,expression,and identification the gene of Cor h 1 from Corylus Heterophylla |
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| MO Xucheng,WU Xuli,LIU ZhigangInstitute of Allergy , Immunology Shenzhen University,Shenzhen ,China.Cloning,expression,and identification the gene of Cor h 1 from Corylus Heterophylla[J].Immunological Journal,2009,25(2). |
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| Authors: | MO Xucheng WU Xuli LIU ZhigangInstitute of Allergy Immunology Shenzhen University Shenzhen China |
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| Institution: | MO Xucheng,WU Xuli,LIU ZhigangInstitute of Allergy , Immunology Shenzhen University,Shenzhen 518060,China |
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| Abstract: | Objective To clone,express,and identify the the gene of Cor h 1 from Corylus heterophylla.Methods The Cor h 1 gene was amplified by PCR and cloned into pMD18-T for sequencing.Then the interesting gene was subcloned into pET-28a for expression.Results The length of gene was 486 bp,coding 161 amino acids.The E-coli strain could express a recombinant protein with a molecular weight of 17 600.Conclusion The gene of Cor h 1 is successfully cloned and expressed in this study,and the recombinant protein possesses ... |
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| Keywords: | Cor h 1 |
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