| 靶向抑制人SREBP-1基因对高糖刺激下人肾小管上皮细胞脂滴形成的影响 |
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| 引用本文： | 郝军,石宏,赵松,任韫卓,段惠军. 靶向抑制人SREBP-1基因对高糖刺激下人肾小管上皮细胞脂滴形成的影响[J]. 中国药理学通报, 2009, 25(3) |
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| 作者姓名： | 郝军 石宏 赵松 任韫卓 段惠军 |
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| 作者单位： | 1. 河北医科大学病理学教研室,河北,石家庄,050017
2. 河北医科大学附属口腔医院,河北,石家庄,050017 |
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| 基金项目： | 河北省科技厅资助项目 |
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| 摘 要： | 目的构建人SREBP-1基因的shRNA载体并转染人肾小管上皮细胞(HKC)明确是否沉默SREBP-1基因的表达可减轻高糖环境引起的细胞内脂滴形成。方法设计两对针对人SREBP-1基因的干扰靶序列及短链寡核苷酸和线性化的pGenesil-1质粒进行连接,筛选鉴定并最终命名为pGenesil-1-SREBP1-1和pGenesil-1-SREBP1-2。体外培养人肾小管上皮细胞并随机分组,采用阳离子脂质体法转染细胞后给予高糖刺激48h,在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,半定量RT-PCR和Westernblot分析目标基因表达丰度的变化,并采用油红O染色检测细胞内脂滴。结果经酶切及测序鉴定证明构建的重组载体pGenesil-1-SREBP1-1、pGenesil-1-SREBP1-2序列正确;转染HKC细胞后均可表达绿色荧光;RT-PCR和Westernblot显示pGenesil-1-SREBP1-1、pGenesil-1-SREBP1-2能够有效抑制高糖环境下HKC细胞SREBP-1的表达,与阴性质粒对照组相比,差异有统计学意义。进一步研究发现在HKC细胞内,SREBP-1基因表达沉默明显抑制了脂肪酸合成酶(FAS)的转录,细胞内脂滴明显减少。结论有效沉默高糖刺激下HKC细胞SREBP-1的基因表达可通过抑制FAS转录而减少细胞内脂滴形成。
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| 关 键 词： | 固醇调节元件结合蛋白-1 人肾小管上皮细胞 RNA干扰 短发夹状干扰RNA 脂滴形成 脂肪酸合成酶 |
Effects of SREBP-1 targeted RNAi on lipid droplet formation in HKC cells under stimulation of high glucose |
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| HAO Jun,SHI Hong,ZHAO Song,REN Yun-zhuo,DUAN Hui-jun. Effects of SREBP-1 targeted RNAi on lipid droplet formation in HKC cells under stimulation of high glucose[J]. Chinese Pharmacological Bulletin, 2009, 25(3) |
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| Authors: | HAO Jun SHI Hong ZHAO Song REN Yun-zhuo DUAN Hui-jun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SREBP-1(sterol regulation element binding protein-1) HKC(human renal proximal tubular epithelial cell line) RNAi(RNA interference) shRNA(small hairpin RNA) lipid droplets formation FAS(fatty acid synthase) |
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