植物雌激素染料木素对狗体外冠状血管的舒张作用及其机制

目的：以血管张力变化为指标，对染料木素和17β-雌二醇的心血管保护作用及相关机制进行探讨和比较。方法：①实验于2005—04／10在湖南学院机能实验室完成。选用雄性杂交家狗心脏，把狗心放在冰冷的K—H液中从屠宰场取回进行实验。染料木索（存在于大豆的植物雌激素），17β-雌二醇，吲哚美辛，Nω-L-硝基精氨酸。放线菌酮，前列腺索F2α和缓激肽，正矾酸钠，均购自Sigma公司；甲烯蓝由上海润捷化学试剂有限公司提供。用蒸馏水溶解，它莫西酚、染料术紊、17β-雌二醇用二甲亚砜溶解配制，吲哚美辛用体积分数0.2乙醇溶解。②制备狗冠状动脉血管环，固定于恒温肌槽内，观察染料木紊与17β-雌二醇对KCl预收缩离体冠状血管环的舒张作用：血管环稳定后，向浴槽中加入50mmol／LKCl。待血管环收缩张力达坪值后。用K-H液冲洗。然后，20min换液1次，平衡30min后重复上述实验，待血管环张力达高峰并稳定后，分别加入染料木索与17β-雌二醇，累积浓度为1，4，8，40和80μmol／L，观察血管环张力变化。观察阻断剂及内皮细胞对染料木紊与17β-雌二醇舒血管作用的影响：重复前述实验内容后，用K-H液冲洗，每20min换液1次，温育1,5h，血管环稳定后，向浴槽中分别加入Nω-L-硝基精氨酸1&;#215;10^-4mol／L，它奠西酚10^-5mol／L，吲哚美辛1&;#215;10^-5mol／L，正矾酸钠1&;#215;10^-5mol／L或放线菌酮1&;#215;10^-5mol／L，甲烯蓝1&;#215;10^-5mol／L，温育15min或用棉签擦除内皮细胞后，重复前述实验内容。对比染料木紊与17β-雌二醇对KCl50mmol／L预收缩血管平滑肌的舒张作用的变化，并随时记录张力的变化值。③用线性回归法计算染料木素与17β-雌二醇的使激动剂效应降低50％时所采用的拮抗剂的浓度。两组间计量资料差异比较采用t检验，3组或3组以上资料差异比较采用单因素方差分析。结果：①染料木素与17β-雌二醇作用相似，均可使50mmol／L KCl预收缩冠状动脉血管环产生剂量依赖性舒张作用（r=0．96，P〈0．01），使激动剂效应降低50％时所采用的拮抗剂的浓度分别为（16．37&;#177;5．19）μmol／L和（22．64&;#177;8．26）μmol／L。②除内皮细胞或加入一氧化氮合酶抑制剂Nω-L-硝基精氨酸1&;#215;10^-4mol/L，甲烯蓝1&;#215;10^-4mol／L或正矾酸钠1&;#215;10^-5mol／L温育，染料木素对50mmol／LKCl预收缩动脉血管环产生的量效舒张作用无明显改变（P〉0．05）。但17β-雌二醇对50mmol／LKCl预收缩动脉血管环产生的量效舒张作用有明显改变（P〈0．01），1&;#215;10^-5mol／L吲哚美辛，它莫西酚与放线菌酮对两者量效舒张血管的作用均无明显影响（P〉0．05）。结论：①染料木索和17β-雌二醇对冠状动脉毗管的舒张作用与前列腺素类物质的合成和血管壁传统雌激素受体无关，与雌激素经典核内作用途径无关。②17β-雌二醇的作用部分与内皮细胞释放的一氧化氮有关。③酪氨酸蛋白激酶系统可能参与了冠状动脉血管张力的调节。

Diastolic effects of genistein on canine coronary arteries and its mechanism