| 乙型肝炎病毒S基因四环素调控体系的构建及其在真核细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 雷宇,黎燕,王蜀强,陈压西,周智,任红.乙型肝炎病毒S基因四环素调控体系的构建及其在真核细胞中的表达[J].重庆医科大学学报,2007,32(10):1020-1022. |
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| 作者姓名： | 雷宇 黎燕 王蜀强 陈压西 周智 任红 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属第二医院肝病治疗研究中心,重庆,400010 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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重庆市渝中区科委基金 |
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| 摘 要： | 目的:构建乙型肝炎病毒S基因的四环素调控表达载体,并研究在真核细胞中四环素对S基因的调控表达,以期用于基因治疗实验.方法:将乙型肝炎病毒S基因插入启动子内含有2个四环素超纵子(TO)的质粒pcDNA4,并用脂质体将重组质粒pcDNA4-S和含有四环素抑制基因的质粒pcDNA6共转染入真核细胞HepG2中,用Zeocin(400μg/ml)及Blasticidin(10μg/ml)进行抗性筛选,约20天形成抗性克隆,建立在四环素诱导下能稳定表达S基因的细胞系.以不同浓度的四环素(0.5μg/ml,1.0μg/ml,2.0μg/ml,3.0μg/ml)进行诱导,用微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测S抗原的表达,以确定四环素的最佳浓度.结果:转染了重组质粒的HepG2细胞,在无四环素环境下HBsAg表达量很低,当加入不同浓度的四环素诱导后,HBsAg表达量明显增加,但所测HBsAg的S/N值无明显差异.结论:成功构建了乙型肝炎病毒S基因四环素调控表达载体,并在真核细胞中进行了四环素的调控表达.
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| 关 键 词： | 乙肝病毒 四环素 调控表达 |
| 文章编号： | 0253-3626（2007）10-1020-03 |
| 修稿时间： | 2007-03-08 |
Construction of the tetracycline regulating expression system of HBV-S gene and its expression in eukaryotic cells |
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| LEI Yu,et al.Construction of the tetracycline regulating expression system of HBV-S gene and its expression in eukaryotic cells[J].Journal of Chongqing Medical University,2007,32(10):1020-1022. |
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| Authors: | LEI Yu |
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| Institution: | Liver Diseases Therapy Center,the Second Affiliated Hospital, Chongqing Medical University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis B virus Tetracycline Regulating expression |
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