黄连解毒汤通过诱导自噬减轻脓毒症小鼠肝损伤

目的 探讨黄连解毒汤对盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的脓毒症小鼠肝损伤保护作用中自噬相关蛋白的表达。方法 将60只8周龄C57BL/6小鼠随机分为假手术组、脓毒症模型组、黄连解毒汤低、高剂量组（1.44，2.88 g?kg^-1）共4组（n=15）。连续给药3 d，末次给药1 h，盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型。观察小鼠24 h生存率；另取5只，术后12 h处死小鼠，收集血清和肝组织。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中炎症因子白细胞介素-6（IL-6），肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白细胞介素-1β（IL-1β）的水平；生化法检测血中丙氨酸氨基转移酶（ALT），天冬氨酸氨基转移酶（AST）的水平；苏木素-伊红（HE）染色观察肝组织的病理变化；TdT介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）染色观察肝细胞凋亡指数（AI）；蛋白免疫印迹法检测肝组织中高迁移率族蛋白1（HMGB1），自噬效应蛋白1（Beclin1），自噬标志物微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ/Ⅰ（LC3-Ⅱ/Ⅰ）的表达。结果 与假手术组比较，模型组小鼠12，24 h生存率明显降低，血清中炎症因子IL-6，TNF-α，IL-1β水平明显升高（P<0.05），AST，ALT活性明显增加（P<0.05），肝细胞肿胀、炎症细胞浸润，肝细胞凋亡，HMGB1表达明显增加（P<0.05），自噬相关蛋白Beclin1的表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ增加（P<0.05）；与模型组比较，各给药组脓毒症小鼠12，24 h生存率明显提高，炎症因子IL-6，TNF-α水平及AST，ALT活性明显降低（P<0.05），肝组织损伤明显减轻，肝细胞凋亡减少（P<0.05），HMGB1的表达明显减少（P<0.05），Beclin1的表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ明显增加（P<0.05）。结论 黄连解毒汤可能通过诱导自噬、抑制凋亡等机制，减轻CLP所致脓毒症小鼠肝损伤。

Huanglian Jiedutang Alleviates Liver Injury in Septic Mice by Inducing Autophagy