彝药益元化腐汤浸膏对溃疡性结肠炎模型T细胞亚群干预机制研究*

目的研究彝药益元化腐汤调控T细胞亚群介导治疗溃疡性结肠炎的效应机制,为益元化腐汤临床应用治疗溃疡性结肠炎提供科学基础。方法 32只C57BL/6健康雌性小鼠随机分为正常组、模型组、益元化腐汤中剂量（4.05 g·kg-1）和高剂量组（8.1 g·kg-1）,每组8只。除正常组,其余以自由饮水的方式给予3%葡聚糖硫酸钠（sodium dextran sulfate,DSS）诱导建立溃疡性结肠炎小鼠模型,每2 d更换1次饮用水,自饮用DSS第1天起,各组按相应剂量灌胃给药,每日1次,连续8 d;采用疾病活动指数（diseases activity index,DAI）和苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin staining,HE）分别评价溃疡性结肠炎症状及结肠组织形态学变化;荧光定量PCR（qPCR）检测淋巴细胞T细胞亚群相关因子转录的相对表达水平;流式细胞术（flow cytometry）检测T细胞亚群中辅助性T细胞1（T-helper 1 cell, Th1）、辅助性T细胞17（T-helper 17 cell,Th17）和调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）的表达水平。结果 与正常组比较,病理模型组小鼠体质量和结肠质量显著下降、结肠长度显著缩短（P<0.05或P<0.01）;与病理模型组比较,益元化腐汤组显著增加小鼠体质量、结肠质量及其长度（P<0.05或P<0.01）,改善结肠病理损伤程度;流式细胞术检测结果显示,益元化腐汤药物干预显著下调γδTCR表达（P<0.05）,且抑制Th1细胞（CD4+ IFN-γ+ T细胞）、Th17细胞（CD4+ IL-17+ T细胞）绝对数量和比例（P<0.01）,然而对Treg细胞（CD4+ Foxp3+ 调节性T细胞）表达无明显影响。qPCR检测结果显示,益元化腐汤显著下调UC小鼠Th17细胞因子IL-17A和转录因子RORγτ mRNA表达（P<0.01）。结论 彝药益元化腐汤可能通过抑制Th17细胞诱导的炎症反应介导治疗溃疡性结肠炎。

Study on Intervention Mechanism of Yi Medicine Yiyuanhuafu Decoction Extractum on T Lymphocyte Subsets in Ulcerative Colitis Model