三物白散含药血清通过TGF-β/Smad通路抑制TGF-β1诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化

目的 基于转化生长因子-β/Smad（TGF-β/Smad）信号通路，体外研究三物白散含药血清对TGF-β₁诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化（EMT）的影响及其机制。方法 SPF级3月龄雄性SD大鼠28只，随机分为空白组及三物白散低、中、高剂量组，每组7只，三物白散低、中、高剂量组分别按0.031 25、0.062 5、0.125 g·kg^-1·d^-1的剂量灌胃，空白组以等体积超纯水灌胃。每日1次，连续7 d。末次给药后45 min经腹主动脉取含药血清；细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测三物白散高剂量组含药血清对SGC-7901细胞活性的影响；镜下观察经TGF-β₁和三物白散含药血清处理后的细胞形态变化；细胞划痕实验和Transwell实验分别检测经TGF-β₁诱导和三物白散低、中、高剂量组含药血清处理后SGC-7901细胞的迁移率和侵袭率；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞E-钙黏蛋白（E-cadherin）、Snail、TGF-β₁、Smad3、磷酸化（p）-Smad3、Smad7蛋白的表达。结果 与空白组比较，10%、15%、20%三物白散高剂量组含药血清可呈浓度-时间依赖性抑制SGC-7901细胞活性；与空白组比较，模型组细胞失去梭形形态，多数细胞变圆、变长；与模型组比较，各药物组细胞伪足减少，细胞变小且形态恢复正常；与空白组比较，模型组细胞迁移和侵袭能力增强（P<0.01）；与模型组比较，三物白散中、高剂量组处理SGC-7901细胞24 h后能显著抑制其迁移能力（P<0.01）；三物白散低、中、高剂量组处理SGC-7901细胞48 h后均能显著抑制其迁移能力（P<0.01）；与模型组比较，三物白散低、中、高组剂量组均能显著抑制其侵袭能力（P<0.01）；与空白组比较，模型组E-cadherin及Smad7蛋白的表达水平显著降低（P<0.01），Snail、p-Smad3、TGF-β₁蛋白的表达水平显著升高（P<0.01），Smad3总蛋白水平不变；与模型组比较，三物白散高剂量组E-cadherin蛋白显著增加（P<0.01）、三物白散中剂量组有明显上升（P<0.05）；Smad7蛋白三物白散中、高剂量组表达水平显著增加（P<0.01）；三物白散中、高剂量组Snail蛋白表达水平显著降低（P<0.01）；三物白散低、中、高组TGF-β₁、p-Smad3蛋白表达水平均显著降低（P<0.01）。三物白散含药血清可以有效地逆转TGF-β₁诱导的人胃癌SGC-7901细胞EMT，并可能通过TGF-β/Smad信号通路发挥作用。结论 三物白散能抑制TGF-β₁诱导的SGC-7901细胞EMT的发生，其机制可能与调控TGF-β/Smad信号通路有关。