四君子汤调节NKG2A表达影响NK细胞抗结肠癌作用

目的 探讨中药复方四君子汤通过调节NKG2A的表达影响自然杀伤（NK）细胞抗结肠癌的作用。方法 分离、纯化来自健康人外周血NK细胞进行培养，分别构建人NK细胞单培、HCT116细胞单培和NK细胞与HCT116细胞共培模型，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测NK细胞中自然杀伤细胞2族成员A（NKG2A）、白细胞介素（IL）-15及结肠癌细胞中组织相容性白细胞抗原E（HLA-E） mRNA的表达，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测NK细胞中IL-15分泌；噻唑蓝（MTT）比色法筛选IL-15的浓度，检测四君子汤和IL-15对NK细胞活性和共培模型中HCT116细胞活性的影响，Real-time PCR检测四君子汤和IL-15对NK细胞中NKG2A和HCT116中HLA-E mRNA表达的影响；使用Anti-NKG2A抗体（M）阻断NKG2A/HLA-E通路，MTT比色法检测共培模型中HCT116细胞增殖情况。结果 与单培组比较，NK细胞和HCT116细胞相互作用引起NK细胞的NKG2A和HCT116中的HLA-E mRNA表达均上调（P<0.05）；IL-15 mRNA表达和分泌也增加（P<0.05）；IL-15可增强NK细胞活性和抗结肠癌作用（P<0.01），也可上调NKG2A表达（P<0.05）；与空白组比较，四君子汤组、四君子汤+IL-15组的NK细胞活性和抗结肠癌作用进一步增加（P<0.01），Real-time PCR结果显示，与空白组比较，四君子汤组和四君子汤+IL-15组中NK细胞NKG2A表达下调（P<0.05），共培模型中四君子汤组HCT116中HLA-E表达下调（P<0.01）；与相应未加M组比较，M组与IL-15+M组HCT116细胞增殖被抑制（P<0.01）。结论 NK细胞与结肠癌细胞相互作用可引起NKG2A-HLA-E通路活化导致NK功能受损，四君子汤可抑制该信号激活从而恢复NK细胞抗结肠癌作用。

Si Junzitang Regulates NKG2A Expression to Improve Anti-colon Cancer Function of NK Cells