膈下逐瘀汤对EMT气滞血瘀型大鼠NF-κB信号通路及其下游因子的影响

目的 探讨膈下逐瘀汤对子宫内膜异位症（EMT）气滞血瘀型大鼠的治疗作用及其机制研究。方法 从60只SPF级雌性未孕健康SD大鼠中随机抽取6只作为空白组，其余采用复合因素法构建气滞血瘀型EMT大鼠模型。从造模成功的36只大鼠中随机抽取30只分为模型组、甲羟孕酮组（0.416 mg·kg^-1）及膈下逐瘀汤低、中、高剂量组（4.063、8.125、16.25 g·kg^-1），每组6只，每天灌胃1次，连续4周。通过大鼠病理学变化、异位灶体积反映大鼠造模情况及膈下逐瘀汤对EMT大鼠的影响；取各组内膜组织进行苏木素-伊红（HE）染色，观察组织病理变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组血清上清液中白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-6（IL-6）含量；免疫组化（IHC）检测各组大鼠组织中核转录因子-κB（NF-κB）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）蛋白表达情况；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测NF-κB、MMP-9、VEGF、Bax mRNA表达。结果 治疗后，膈下逐瘀汤低、中、高剂量组和甲羟孕酮组异位灶体积明显缩小；镜下病理观察可见假手术组与空白组大鼠子宫内膜结构完整，腺体及间质细胞生长良好，腺上皮细胞排列紧密整齐，胞浆丰富呈高柱状；间质细胞分布均匀，血管丰富，呈梭形。与空白组、假手术组比较，模型组以柱状上皮和立方上皮为主，异位内膜上皮细胞呈短柱状，部分为假层状，细胞形态不完整，间质细胞和腺体的数量减少，部分腺体呈圆形，蜕膜发育不良。与空白组比较，模型组血清中IL-10含量明显降低（P<0.05），IL-6含量明显升高（P<0.05），模型组在位、异位内膜组织中NF-κB、VEGF、MMP-9蛋白表达明显升高（P<0.05），Bax蛋白表达明显降低；与模型组比较，膈下逐瘀汤中、高剂量组血清中IL-10含量明显升高（P<0.05），IL-6含量明显降低（P<0.05），膈下逐瘀汤各剂量组大鼠在位、异位内膜组织NF-κB、VEGF、MMP-9蛋白表达明显降低（P<0.05），Bax蛋白表达明显升高（P<0.05）。与模型组异位内膜比较，膈下逐瘀汤中、高剂量组异位内膜中NF-κB、MMP-9、VEGF mRNA表达明显降低（P<0.05），Bax mRNA表达明显升高（P<0.05）。结论 膈下逐瘀汤具有抑制气滞血瘀型EMT大鼠异位内膜组织扩大及侵袭，其机制可能与干预NF-κB信号通路过度激活所介导的免疫抑制、改善炎症反应、阻断微血管新生功能有关。