牡丹花总黄酮对痛风性肾病大鼠NLRP3炎症小体及炎症因子表达的影响

目的 探究牡丹花总黄酮对大鼠痛风性肾病模型保护作用的可能机制。为治疗痛风性肾病的药物研究提供科研数据支撑。方法 使用腺嘌呤合并乙胺丁醇复制大鼠痛风性肾病模型，大鼠随机每12只分为空白组、模型组、别嘌醇组（42 mg·kg^-1）、阳性药痛风舒片组（600 mg·kg^-1）、牡丹花总黄酮高、中、低剂量组（TFPF，260、130、65 mg·kg^-1）；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）含量，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠肾脏组织匀浆中转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、IL-1β含量；苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏组织细胞形态变化；原位末端标记法（TUNEL）观察肾脏组织细胞DNA损伤情况；免疫组化法观察肾脏NOD样受体蛋白3（NLRP3）、胱天蛋白酶-1（Caspase-1）、IL-1β蛋白表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾脏组织中NLRP3、Caspase-1、核转录因子-κB（NF-κB）蛋白的表达量。结果 与空白组比较，模型组大鼠血清中TNF-α、MCP-1、IL-1β、IL-18含量均显著增加（P<0.01），模型组大鼠肾脏NLRP3、Caspase-1、NF-κB、IL-1β表达量均显著升高（P<0.01），肾组织细胞呈现胞质肿胀、细胞膜破裂，细胞核固缩断裂数量增加，模型组大鼠肾组织细胞TUNEL染色阳性率显著升高（P<0.01），大鼠肾组织匀浆中IL-1β、TGF-β₁的含量均显著上升（P<0.01）；与模型组比较，牡丹花总黄酮高、中剂量组可不同程度的降低大鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-18含量（P<0.05，P<0.01），牡丹花总黄酮高剂量组MCP-1含量明显降低（P<0.01），牡丹花总黄酮高、中剂量组明显降低肾组织匀浆中TGF-β₁含量（P<0.05，P<0.01），牡丹花总黄酮中剂量组肾组织匀浆中IL-1β含量显著降低（P<0.01）；HE染色显示牡丹花总黄酮各剂量组可不同程度的改善肾小管上皮细胞状态，减轻胞质肿胀，细胞核固缩的数量；降低肾组织细胞TUNEL染色阳性率（P<0.01），肾脏细胞DNA损伤减少；抑制肾脏组织细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、NF-κB蛋白的表达（P<0.05，P<0.01）。结论 牡丹花总黄酮对痛风性肾病模型大鼠的肾脏保护作用与抑制炎症因子分泌相关，其抗炎作用机制可能是通过抑制NF-κB信号通路与NLRP3/Caspase-1通路的活化，从而下调IL-1β、IL-18等炎性因子表达、成熟及释放，遏制肾脏细胞程序性死亡的初始阶段细胞焦亡的发生，从而逆转痛风性肾病肾脏的炎症损伤。

Total Flavonoids of Peony Flower Regulate NLRP3 Inflammasome and Expression of Inflammatory Cytokines in Gouty Nephropathy Rats