基于HGF/C-Met信号通路探讨乌梅丸对寒热错杂证Lewis肺癌小鼠的抑癌作用及机制

目的 基于肝细胞生长因子及其受体（HGF/C-Met）信号通路探讨乌梅丸对寒热错杂证Lewis肺癌小鼠的抑癌效果及作用机制。方法 将20只健康雄性小鼠分为正常组、模型组、顺铂组和乌梅丸组，每组5只。通过丙硫氧嘧啶+知母石膏水煎液+番泻叶灌胃、冰水游泳与干酵母混悬液皮下注射，联合Lewis细胞悬液右侧腋窝皮下注射的方式制备寒热错杂证Lewis肺癌小鼠模型。模型制备完成后，顺铂组予以4.0 mg·kg^-1顺铂腹腔注射，乌梅丸组予以12.5 mL·kg^-1乌梅丸灌胃，模型组予以等体积蒸馏水灌胃，连续6周。取材检验，测量和计算瘤质量、瘤体积、抑癌率和抑制肺癌转移率，采用苏木素-伊红（HE）染色观察肺癌组织病理学形态，采用免疫组化法分析肿瘤组织生长状态，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测HGF、C-Met mRNA表达，采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测HGF、C-Met、存活素（Survivin）和X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）的蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组HGF、C-Met mRNA表达显著升高（P<0.01），HGF、C-Met、Survivin和XIAP的蛋白表达显著升高（P<0.01）。与模型组比较，乌梅丸组的阳性细胞比率、阳性细胞密度、阳性评分降低（P<0.05），组织化学评分、瘤质量、瘤体积显著降低（P<0.01），HGF、C-Met mRNA表达显著降低（P<0.01），HGF、C-Met、Survivin和XIAP的蛋白表达显著降低（P<0.01）。与模型组比较，顺铂组的阳性细胞率、阳性细胞密度明显降低（P<0.05），阳性评分、瘤质量、瘤体积显著降低（P<0.01），HGF、C-Met mRNA表达显著降低（P<0.01），HGF、C-Met、Survivin、XIAP蛋白表达显著降低（P<0.01）；组织化学评分相当，差异无统计学意义。与顺铂组比较，乌梅丸组HGF mRNA表达升高（P<0.01）；阳性细胞率、阳性细胞密度、组织化学评分、阳性评分、瘤质量、瘤体积相当，C-Met mRNA表达及HGF、C-Met、Survivin、XIAP蛋白表达相当，差异均无统计学意义。结论 乌梅丸能够通过抑制HGF/C-Met信号通路减缓寒热错杂证Lewis肺癌小鼠的肺癌进展。

Effect and Mechanism of Wumeiwan Against Lewis Lung Cancer in Mice with Syndrome of Cold and Heat in Complexity Based on HGF/C-Met Signaling Pathway