葛根芩连汤及配伍调控Nrf2/NQO1信号通路抑制溃疡性结肠炎大鼠氧化应激损伤

目的 探讨葛根芩连汤治疗溃疡性结肠炎（UC）大鼠的可能机制，同时讨论缺少药味对葛根芩连汤疗效的影响。方法 采用自由饮用5%葡聚糖硫酸钠盐水溶液诱导UC大鼠模型，雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药组（柳氮磺吡啶肠溶片，350 mg·kg^-1）、葛根芩连汤全方组（17 g·kg^-1）、全方去甘草组（17 g·kg^-1）、全方去葛根组（17 g·kg^-1）、葛根甘草组（17 g·kg^-1）和黄芩黄连组（17 g·kg^-1）。用1，1-二苯基-2-苦肼基（DPPH）、2，2-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）和荧光漂白后恢复技术（FRAP）法评估葛根芩连汤及其不同配伍组体外抗氧化活性；通过比较大鼠体质量变化和记录结肠长度、观察结肠剖面和苏木素-伊红（HE）染色病理组织切片评估给药治疗后各组大鼠结肠组织损伤程度；比色法测定大鼠血清中髓过氧化物酶（MPO）、脂质过氧化物（LPO）、丙二醛（MDA）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、过氧化氢酶（CAT）和还原型谷胱甘肽（GSH）水平变化；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测结肠组织中核因子E₂相关因子2（Nrf2）、醌氧化还原酶1（NQO1）和血红素氧合酶-1（HO-1） mRNA和蛋白表达的变化。结果 与正常组比较，模型组大鼠结肠黏膜组织坏死，炎症浸润，血清中过氧化物MPO、LPO和MDA含量显著上升（P<0.01），抗氧化酶T-SOD、CAT和GSH活性显著下降（P<0.01），Nrf2、NQO1和HO-1 mRNA表达均呈下降趋势，Nrf2蛋白表达显著下降（P<0.01），NQO1和HO-1蛋白表达呈下降趋势；与模型组比较，葛根芩连汤及配伍组能改善UC大鼠结肠组织病理损伤和形态结构，显著降低大鼠血清中过氧化物MPO、LPO和MDA水平（P<0.05），提高无葛根组抗氧化酶T-SOD，无甘草组、黄芩黄连组CAT和GSH（P<0.01）活性，增加结肠组织中Nrf2、NQO1和HO-1 mRNA和蛋白的相对表达，全方组差异明显（P<0.05）。结论 葛根芩连汤对UC大鼠病理损伤具有恢复作用，其机制可能与激活Nrf2信号通路、抑制氧化应激反应有关。葛根芩连汤组方中缺少君药葛根或仅有臣药黄芩和黄连对其治疗UC有较大影响。研究结果可为中药复方临床合理应用及复方配伍机制研究做出有益探索。

Gegen Qinliantang and Its Combinations Inhibit Oxidative Stress Injury in Ulcerative Colitis Rats by Regulating Nrf2/NQO1 Signaling Pathway