| 人参皂苷Rg1对大鼠坐骨神经冷冻保存后SCs活性及异体移植后神经再生的影响 |
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| 引用本文： | 刘云霄,黄英如,石一峰,张松,杨康,冼华.人参皂苷Rg1对大鼠坐骨神经冷冻保存后SCs活性及异体移植后神经再生的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(13):52-61. |
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| 作者姓名： | 刘云霄 黄英如 石一峰 张松 杨康 冼华 |
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| 作者单位： | 1.重庆医科大学 中医药学院，重庆 400016;2.中医药防治代谢性疾病重庆市重点实验室，重庆 400016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目（81373668，81674002） |
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| 摘 要： | 目的 观察人参皂苷Rg1（G-Rg1）对冷冻保存大鼠坐骨神经施万细胞（SCs）生物学活性影响，探讨G-Rg1减轻冷冻保存大鼠坐骨神经SCs损伤的可行性。方法 取SD大鼠双侧坐骨神经，随机分为7组：新鲜组、空白组、G-Rg1组（1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4、1×10-3 mol·L-1 G-Rg1），除新鲜组神经外，将其余各组神经依次置于含0、1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4、1×10-3 mol·L-1 G-Rg1的冷冻保存液中液氮保存4周。原位末端标记法（TUNEL）/S100检测各组神经SCs凋亡，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胱天蛋白酶（Caspase）-9、Caspase-3和主要组织相容性复合体（MHC）-Ⅰ、MHC-Ⅱ表达。将新鲜组和液氮保存4周的6组神经，置于37 ℃、5% CO2培养箱中培养7 d，Western blot检测胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）、神经生长因子（NGF）表达。用液氮保存4周的空白组和1×10-6、1×10-5、1×10-4 mol·L-1 G-Rg1组坐骨神经，同种异体移植修复Wistar大鼠坐骨神经10 mm缺损（空白移植组，1×10-6、1×10-5、1×10-4 mol·L-1 G-Rg1移植组），同时设新鲜坐骨神经同种异体移植、同系移植对照组。移植术后16周，电生理检测肌肉复合动作电位（CMAP）和神经传导速度（NCV），神经丝（NF）-200免疫荧光单染、透射电镜和甲苯胺蓝染色分析再生神经组织学。结果 与新鲜组比较，空白组和G-Rg1各浓度组Caspase-9、Caspase-3表达、SCs凋亡明显升高（P<0.05，P<0.01），GDNF、NGF表达及MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ表达显著降低（P<0.01）。与空白组比较，1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4 mol·L-1 G-Rg1组Caspase-9、Caspase-3表达显著降低（P<0.01）；1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4 mol·L-1 G-Rg1组SCs凋亡降低（P<0.05，P<0.01），1×10-3 mol·L-1组升高（P<0.05）；1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4 mol·L-1 G-Rg1组GDNF、NGF表达升高（P<0.05，P<0.01），1×10-3 mol·L-1组降低（P<0.01）；G-Rg1各浓度组MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ表达差异无统计学意义。与1×10-7、1×10-3 mol·L-1 G-Rg1组比较，1×10-6、1×10-5、1×10-4 mol·L-1组Caspase-3表达、SCs凋亡降低（P<0.05，P<0.01），GDNF、NGF表达升高（P<0.05，P<0.01），MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ表达差异无统计学意义。移植术后16周，与同系移植组比较，空白移植组和G-Rg1移植组各组CMAP、NCV、髓鞘厚度、有髓神经纤维数显著降低（P<0.01），1×10-6、1×10-4 mol·L-1 G-Rg1移植组NF200降低（P<0.01）；与同异移植组比较，空白移植组和G-Rg1移植各组CMAP、NCV、NF200、髓鞘厚度、有髓神经纤维数升高（P<0.05，P<0.01）；与空白移植组比较，G-Rg1移植各组CMAP、NF200、髓鞘厚度、有髓神经纤维数升高（P<0.05，P<0.01）；G-Rg1移植各组间，1×10-5 mol·L-1移植组各项指标优于1×10-4、1×10-6 mol·L-1移植组（P<0.05）。结论 一定浓度的G-Rg1能维持冷冻保存的大鼠坐骨神经SCs生物活性，减轻神经冷冻保存损伤，异体移植后能促进受者神经再生。
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| 关 键 词： | 人参皂苷Rg1 周围神经冷冻保存 冷冻保存损伤 异体神经移植 神经再生 |
| 收稿时间： | 2021/11/20 0:00:00 |
Effect of Ginsenoside Rg1 on Biological Activity of Cryopreserved Schwann Cells and Nerve Regeneration After Allograft in Rat Sciatic Nerve |
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| LIU Yunxiao,HUANG Yingru,SHI Yifeng,ZHANG Song,YANG Kang,XIAN Hua.Effect of Ginsenoside Rg1 on Biological Activity of Cryopreserved Schwann Cells and Nerve Regeneration After Allograft in Rat Sciatic Nerve[J].China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(13):52-61. |
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| Authors: | LIU Yunxiao HUANG Yingru SHI Yifeng ZHANG Song YANG Kang XIAN Hua |
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| Keywords: | ginsenoside Rg1 peripheral nerve cryopreservation cryodamage allograft nerve regeneration |
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